Gå til innholdet
DC2.4
Vev
Benmarg
Synonymer
DC 2.4

Dokumenter

DC2.4

Cell line · Produktnummer 305515

DC2.4-cellelinjen er en immortalisert dendritisk cellelinje fra mus som stammer fra benmarg. Den brukes ofte til å studere biologien til dendritiske celler (DC)...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

DC2.4-cellelinjen er en udødeliggjort dendrittisk cellelinje fra mus som stammer fra benmarg. Den brukes ofte til å studere dendrittiske cellers (DC) biologi, immunresponser og utvikling av immunterapier. DC2.4-celler kjennetegnes av sin rolle som antigenpresenterende celler (APC), og det er kjent at de uttrykker typiske overflatemarkører for dendrittiske celler, som CD11c og MHC klasse I-molekyler. De har imidlertid en umoden fenotype under standard dyrkingsforhold, med lavt uttrykk av MHC klasse II og kostimulerende molekyler som CD40 og CD80. Dette gjør dem nyttige for å undersøke mekanismene og stimuliene som kreves for DC-modning og deres påfølgende immunfunksjoner.

Studier har vist at spesifikke stimuli kan indusere modning av DC2.4-celler. Spesielt eksponering for interferon-gamma (IFN-γ) fører til en betydelig oppregulering av MHC klasse II, CD40, CD80 og CCR7, samt økt cytokinsekresjon, inkludert IL-6, IL-12 og TNF-α. Det er vist at IFN-γ-modnede DC2.4-celler effektivt aktiverer CD8+ cytotoksiske T-celler både in vitro og in vivo, noe som forsterker antitumorimmuniteten. For eksempel har IFN-γ-behandlede, antigenpulserte DC2.4-celler vist seg å indusere robuste CD8+ T-celleresponser og gi beskyttende antitumoreffekter i musemodeller. Dette understreker cellelinjens anvendelighet i forskning på immunterapi mot kreft og utvikling av vaksiner.

I tillegg har DC2.4-celler blitt brukt til å studere interaksjoner mellom vert og patogen, ettersom deres respons på ulike immunutfordringer kan etterligne aspekter ved aktiveringen av det medfødte immunsystemet. Analysen av eksosomale miRNA-profiler fra DC2.4-celler, spesielt når de er infisert med patogener som Toxoplasma gondii, har gitt innsikt i de molekylære mekanismene som ligger til grunn for dendrittiske cellers signalering og immunkommunikasjon. Det differensielle uttrykket av eksosomale miRNA som respons på infeksjon antyder potensielle roller i moduleringen av vertsimmunitet og fremhever nytten av DC2.4 i eksosom- og RNA-basert immunforskning.

Vev
Benmarg
Synonymer
  • DC 2.4

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Uspesifisert
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine dendritic cell line (DC2.4) contains retroviral constructs encoding murine GM-CSF, v-myc and v-raf introduced by transduction, supporting transformation and growth. The inserts are stably present in the dendritic cell-derived line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Dendritiske celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
DC2.4 (Cytion-katalognummer 305515)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_J409

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
Transformant: Rekombinant retrovirus J2

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 10 % FBS, 1 % NEAA og 10 mM HEPES i mediet
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C57BL/6
Donorens alder
Uspesifisert