Skip to content
DC2.4
Tissue
ไขกระดูก
Synonyms
DC 2.4

Documents

DC2.4

Cell line · Product number 305515

The DC2.4 cell line is an immortalized mouse dendritic cell line that originates from bone marrow. It is commonly used to study dendritic cell (DC) biolog...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ DC2.4 เป็นเซลล์ไลน์เดนดริติกของหนูที่ถูกทำให้เป็นอมตะซึ่งมีต้นกำเนิดจากไขกระดูก โดยมักใช้ในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์เดนดริติก (DC) การตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน และการพัฒนาวิธีการรักษาด้วยภูมิคุ้มกันเซลล์ DC2.4 มีลักษณะเด่นคือทำหน้าที่เป็นเซลล์นำเสนอแอนติเจน (APCs) และเป็นที่ทราบกันดีว่ามีการแสดงออกของตัวบ่งชี้ผิวเซลล์ที่เป็นลักษณะเฉพาะของเซลล์เดนไดรต์ เช่น โมเลกุล CD11c และ MHC คลาส Iอย่างไรก็ตาม พวกมันแสดงลักษณะทางฟีโนไทป์ที่ไม่สมบูรณ์ภายใต้เงื่อนไขการเพาะเลี้ยงมาตรฐาน โดยมีการแสดงออกของ MHC class II และโมเลกุลกระตุ้นร่วม เช่น CD40 และ CD80 ในระดับต่ำ สิ่งนี้ทำให้พวกมันมีประโยชน์ในการศึกษาเกี่ยวกับกลไกและสิ่งกระตุ้นที่จำเป็นสำหรับการเจริญเต็มที่ของเซลล์ DC และหน้าที่ทางภูมิคุ้มกันที่ตามมา

การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่าสิ่งกระตุ้นเฉพาะสามารถกระตุ้นการเจริญเติบโตของเซลล์ DC2.4 ได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การสัมผัสกับอินเตอร์เฟอรอน-แกมมา (IFN-γ) จะนำไปสู่การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของ MHC class II, CD40, CD80, และ CCR7 รวมถึงการเพิ่มขึ้นของการหลั่งไซโตไคน์ เช่น IL-6, IL-12, และ TNF-αเซลล์ DC2.4 ที่ถูกกระตุ้นด้วย IFN-γ ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าสามารถกระตุ้นเซลล์ T ชนิด cytotoxic CD8+ ได้อย่างมีประสิทธิภาพทั้งในหลอดทดลองและในร่างกายจริง ส่งผลให้ภูมิคุ้มกันต้านเนื้องอกเพิ่มขึ้นตัวอย่างเช่น เซลล์ DC2.4 ที่ได้รับการกระตุ้นด้วย IFN-γ และแอนติเจน ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถกระตุ้นการตอบสนองของเซลล์ T CD8+ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และให้ผลในการป้องกันมะเร็งในแบบจำลองหนูทดลอง ซึ่งชี้ให้เห็นถึงประโยชน์ของสายพันธุ์เซลล์นี้ในการวิจัยการบำบัดมะเร็งด้วยภูมิคุ้มกันและการพัฒนาวัคซีน

นอกจากนี้ เซลล์ DC2.4 ยังถูกนำมาใช้ในการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรค เนื่องจากปฏิกิริยาของเซลล์เหล่านี้ต่อความท้าทายทางภูมิคุ้มกันต่างๆ สามารถเลียนแบบลักษณะบางส่วนของการกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติได้การวิเคราะห์โปรไฟล์ miRNA ในเอ็กโซโซมจากเซลล์ DC2.4 โดยเฉพาะเมื่อติดเชื้อจากเชื้อโรคเช่น Toxoplasma gondii ได้ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการส่งสัญญาณของเซลล์เดนไดรต์และการสื่อสารทางภูมิคุ้มกัน การแสดงออกที่แตกต่างกันของ miRNA ในเอ็กโซโซมที่ตอบสนองต่อการติดเชื้อชี้ให้เห็นถึงบทบาทที่เป็นไปได้ในการปรับภูมิคุ้มกันของโฮสต์ และเน้นย้ำถึงประโยชน์ของ DC2.4 ในการวิจัยภูมิคุ้มกันที่ใช้เอ็กโซโซมและ RNA เป็นพื้นฐาน

Tissue
ไขกระดูก
Synonyms
  • DC 2.4

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine dendritic cell line (DC2.4) contains retroviral constructs encoding murine GM-CSF, v-myc and v-raf introduced by transduction, supporting transformation and growth. The inserts are stably present in the dendritic cell-derived line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
เซลล์เดนไดรต์

04Identifiers

Citation
DC2.4 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305515)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_J409

05Expression and susceptibility

Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: รีคอมบิแนนท์เรโทรไวรัส J2

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, NEAA 1% และ HEPES 10mM
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
ไม่ระบุ