DC2.4

DC2.4-solulinja on kuolematon hiiren dendriittisolulinja, joka on peräisin luuytimestä. Sitä käytetään yleisesti dendriittisolujen (DC) biologian, immuunivasteiden ja immunoterapioiden kehittämisen tutkimiseen. DC2.4-soluille on ominaista niiden rooli antigeeniä esittelevinä soluina (APC), ja niiden tiedetään ilmentävän tyypillisiä dendriittisten solujen pintamerkkejä, kuten CD11c- ja MHC-luokan I-molekyylejä. Niillä on kuitenkin epäkypsä fenotyyppi tavanomaisissa viljelyolosuhteissa, ja niiden MHC-luokan II ja costimulatoristen molekyylien, kuten CD40:n ja CD80:n, ilmentyminen on vähäistä. Tämän vuoksi ne ovat käyttökelpoisia tutkittaessa mekanismeja ja ärsykkeitä, joita DC:n kypsyminen ja sen jälkeiset immuunitoiminnot edellyttävät.

Tutkimukset ovat osoittaneet, että tietyt ärsykkeet voivat indusoida DC2.4-solujen kypsymisen. Erityisesti altistuminen interferoni-gammalle (IFN-γ) johtaa MHC-luokan II, CD40:n, CD80:n ja CCR7:n merkittävään ylössäätelyyn sekä lisääntyneeseen sytokiinien, kuten IL-6:n, IL-12:n ja TNF-α:n, eritykseen. IFN-γ-kypsytettyjen DC2.4-solujen on osoitettu aktivoivan tehokkaasti CD8+-sytotoksisia T-soluja sekä in vitro että in vivo, mikä tehostaa kasvainvastaista immuniteettia. Esimerkiksi IFN-γ-käsiteltyjen, antigeenipulssattujen DC2.4-solujen on osoitettu indusoivan voimakkaita CD8+ T-soluvasteet ja tuottavan suojaavia kasvainvastaisia vaikutuksia hiirimalleissa. Tämä korostaa solulinjan hyödyllisyyttä syövän immunoterapiatutkimuksessa ja rokotteiden kehittämisessä.

Lisäksi DC2.4-soluja on käytetty isännän ja patogeenin vuorovaikutuksen tutkimiseen, koska niiden vaste erilaisiin immuunihaasteisiin voi jäljitellä synnynnäisen immuunijärjestelmän aktivoitumisen osa-alueita. DC2.4-solujen eksosomaalisten miRNA-profiilien analyysi erityisesti silloin, kun ne ovat saaneet tartunnan patogeeneistä, kuten Toxoplasma gondii, on antanut tietoa dendriittisten solujen signaloinnin ja immuuniviestinnän taustalla olevista molekyylimekanismeista. Eksosomaalisten miRNA:iden erilainen ilmentyminen vasteena infektioon viittaa mahdollisiin rooleihin isännän immuniteetin moduloinnissa ja korostaa DC2.4:n hyödyllisyyttä eksosomi- ja RNA-pohjaisessa immuunitutkimuksessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa