Перейти до вмісту
DC2.4
Тканина
Кістковий мозок
Синоніми
DC 2.4

Документи

DC2.4

Cell line · Номер товару 305515

Клітинна лінія DC2.4 — це імморталізована лінія дендритних клітин миші, що походить із кісткового мозку. Її зазвичай використовують для вивчення біології дендритних клітин (DC)...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія DC2.4 - це імморталізована лінія дендритних клітин миші, яка походить з кісткового мозку. Вона широко використовується для вивчення біології дендритних клітин (ДК), імунних реакцій та розробки імунотерапії. Клітини DC2.4 характеризуються своєю роллю антигенпрезентуючих клітин (АПК) і, як відомо, експресують типові поверхневі маркери дендритних клітин, такі як CD11c і молекули MHC класу I. Однак за стандартних умов культивування вони демонструють незрілий фенотип, з низькою експресією MHC класу II і костимулюючих молекул, таких як CD40 і CD80. Це робить їх корисними для дослідження механізмів і стимулів, необхідних для дозрівання ДК і їх подальших імунних функцій.

Дослідження показали, що специфічні стимули можуть індукувати дозрівання клітин DC2.4. Зокрема, вплив інтерферону-гамма (IFN-γ) призводить до значного посилення регуляції MHC класу II, CD40, CD80 і CCR7, а також до збільшення секреції цитокінів, включаючи IL-6, IL-12 і TNF-α. Доведено, що IFN-γ-дозрілі клітини DC2.4 ефективно активують CD8+ цитотоксичні Т-клітини як in vitro, так і in vivo, посилюючи протипухлинний імунітет. Наприклад, було показано, що оброблені ІФН-γ, антиген-імпульсні клітини DC2.4 індукують потужну відповідь CD8+ Т-клітин і забезпечують захисні протипухлинні ефекти на мишачих моделях. Це підкреслює корисність клітинної лінії в дослідженнях імунотерапії раку та розробці вакцин.

Крім того, клітини DC2.4 використовуються для вивчення взаємодії хазяїн-патоген, оскільки їхня відповідь на різні імунні виклики може імітувати аспекти активації вродженої імунної системи. Аналіз профілів екзосомних міРНК з клітин DC2.4, особливо при інфікуванні патогенами, такими як Toxoplasma gondii, дозволив зрозуміти молекулярні механізми, що лежать в основі сигналізації дендритних клітин та імунної комунікації. Диференційована експресія екзосомних міРНК у відповідь на інфекцію вказує на їхню потенційну роль у модуляції імунітету хазяїна та підкреслює корисність DC2.4 у дослідженнях імунітету на основі екзосом та РНК.

Тканина
Кістковий мозок
Синоніми
  • DC 2.4

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Не вказано
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This murine dendritic cell line (DC2.4) contains retroviral constructs encoding murine GM-CSF, v-myc and v-raf introduced by transduction, supporting transformation and growth. The inserts are stably present in the dendritic cell-derived line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Тип клітини
Дендритна клітина

04Ідентифікатори

Посилання
DC2.4 (номер за каталогом Cytion 305515)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_J409

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
Трансформер: Рекомбінантний ретровірус J2

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10 % FBS, 1 % NEAA та 10 мМ HEPES
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
C57BL/6
Вік донора
Не визначено