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T406
Tessuto
Cervello
Malattia
Glioblastoma
Sinonimi
T-406

Documenti

T406

Cell line · Codice prodotto 300361

The T406 cell line is derived from a human glioblastoma multiforme (GBM), a highly aggressive brain tumor classified as WHO Grade IV. This cell line has b...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare T406 deriva da un glioblastoma multiforme (GBM) umano, un tumore cerebrale altamente aggressivo classificato di grado IV dall'OMS. Questa linea cellulare è stata ampiamente studiata per le sue caratteristiche genetiche, in particolare per la sovraespressione dell'oncogene erbB. L'analisi citogenetica di T406 ha rivelato la polisomia del cromosoma 7, una caratteristica comune nei gliomi di alto grado, con fino a sei copie del cromosoma 7 presenti per cellula. Questa polisomia è correlata a una maggiore espressione dell'oncogene erbB, che svolge un ruolo nella proliferazione e nella sopravvivenza del tumore. La linea cellulare T406 è stata utilizzata per studiare i meccanismi molecolari della progressione del glioblastoma e il ruolo dei recettori dei fattori di crescita nella tumorigenesi.

La T406 è stata anche inclusa in studi che hanno valutato l'eterogeneità delle risposte tumorali alla chemioradioterapia. La ricerca ha dimostrato che T406, insieme ad altre linee cellulari di GBM, mostra una variabilità nell'espressione dell'eparanasi (HPSE) e dell'eparan solfato (HS), coinvolti nel rimodellamento del microambiente tumorale. Questa eterogeneità di espressione può contribuire alla resistenza al trattamento e alla recidiva del tumore, rendendo il T406 un modello importante per comprendere gli effetti della terapia sulla biologia tumorale. Inoltre, il T406 è stato utilizzato come parte di pannelli più ampi di modelli di glioblastoma per esplorare le vie di crescita e resistenza del tumore, rappresentando uno strumento fondamentale nella ricerca preclinica sul cancro.

Tessuto
Cervello
Malattia
Glioblastoma
Sinonimi
  • T-406

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto

04Identificatori

Riferimento bibliografico
T406 (numero di catalogo Cytion 300361)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4570

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
2 volte a settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
53 anni
Etnia
Caucasico