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T406
Tecido
Cérebro
Doença
Glioblastoma
Sinónimos
T-406

Documentos

T406

Cell line · Número do produto 300361

The T406 cell line is derived from a human glioblastoma multiforme (GBM), a highly aggressive brain tumor classified as WHO Grade IV. This cell line has b...

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Recomendado (lote mais recente)
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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular T406 é derivada de um glioblastoma multiforme (GBM) humano, um tumor cerebral altamente agressivo classificado como grau IV da OMS. Esta linha celular tem sido extensivamente estudada pelas suas caraterísticas genéticas, nomeadamente a sobreexpressão do oncogene erbB. A análise citogenética da T406 revelou a polissomia do cromossoma 7, uma caraterística comum nos gliomas de alto grau, com a presença de até seis cópias do cromossoma 7 por célula. Esta polissomia está correlacionada com o aumento da expressão do oncogene erbB, que desempenha um papel na proliferação e sobrevivência do tumor. A linha celular T406 tem sido utilizada para estudar os mecanismos moleculares da progressão do glioblastoma e o papel dos receptores de factores de crescimento na tumorigénese.

A T406 também foi incluída em estudos que avaliam a heterogeneidade das respostas dos tumores à quimiorradioterapia. A investigação demonstrou que a T406, juntamente com outras linhas celulares de GBM, apresenta variabilidade na expressão da heparanase (HPSE) e do sulfato de heparano (HS), que estão envolvidos na remodelação do microambiente tumoral. Esta heterogeneidade na expressão pode contribuir para a resistência ao tratamento e para a recidiva do tumor, tornando a linhagem T406 um modelo importante para compreender os efeitos da terapia na biologia do tumor. Além disso, o T406 tem sido utilizado como parte de painéis maiores de modelos de glioblastoma para explorar o crescimento do tumor e as vias de resistência, servindo como uma ferramenta essencial na investigação pré-clínica do cancro.

Tecido
Cérebro
Doença
Glioblastoma
Sinónimos
  • T-406

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos

04Identificadores

Referência
T406 (número de catálogo Cytion 300361)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4570

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
53 anos
Etnia
Caucasiano