Pereiti prie turinio
IMR-32 ląstelės
Audinys
Smegenys
Liga
Neuroblastoma
Metastazių vieta
Pilvas
Sinonimai
IMR 32, IMR32, Institute for Medical Research-32, GM03320, GM3320C, GM03320D, AG03320, AG3320

Dokumentai

IMR-32 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300148

IMR-32 – tai žmogaus neuroblastomos ląstelių linija, gauta iš vaiko, kuriam buvo diagnozuota neuroblastoma, antinksčių medulos; neuroblastoma – tai piktybinis navikas, kilęs iš neu...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

IMR-32 yra žmogaus neuroblastomos ląstelių linija, gauta iš vaiko, kuriam diagnozuota neuroblastoma - piktybinis navikas, kilęs iš nervinio keteros kamieno ląstelių, antinksčių smegenų. Šioms ląstelėms būdingos nesubrendusių neuronų ląstelių savybės, todėl jos yra vertingas neuronų diferenciacijos, neuroblastomos patogenezės ir neurologinio vystymosi procesų molekulinių mechanizmų tyrimo modelis. IMR-32 ląstelės pasižymi dideliu proliferacijos pajėgumu ir išlaiko gebėjimą sintetinti katecholaminus, ypač dopaminą ir noradrenaliną, kurie yra svarbiausi nervų sistemos neuromediatoriai.

IMR-32 ląstelės pasižymi diploidiniu kariotipu su tam tikromis chromosominėmis aberacijomis, kurios paprastai būdingos neuroblastomai, pavyzdžiui, MYCN onkogeno amplifikacija. Dėl šios savybės jos ypač naudingos neuroblastomos genetinių ir molekulinių veiksnių, įskaitant MYCN vaidmenį naviko genezėje ir progresavime, tyrimams. Be to, IMR-32 ląstelės naudojamos atliekant vaistų atrankinius tyrimus, siekiant įvertinti galimų gydomųjų medžiagų, skirtų neuroblastomai, veiksmingumą ir citotoksiškumą. Tačiau labai svarbu pažymėti, kad šios ląstelės skirtos tik in vitro tyrimams ir netinka jokiems terapiniams ar in vivo taikymams.

Audinys
Smegenys
Liga
Neuroblastoma
Metastazių vieta
Pilvas
Sinonimai
  • IMR 32
  • IMR32
  • Institute for Medical Research-32
  • GM03320
  • GM3320C
  • GM03320D
  • AG03320
  • AG3320

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Neuroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
IMR-32 (Cytion katalogo numeris 300148)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0346

05Išraiška ir jautrumas

Izofermentai
G6PD, B
Jautrumas virusams
Vezikulinis stomatitas (Indiana), paprastoji pūslelinė, vakcinacija, koksaki virusas B3, poliovirusas 3 (silpnai)
Atsparumas virusams
Echovirusas 11
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Kas 3-5 dienas
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
13 mėnesių
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių