Siirry sisältöön
IMR-32-solut
Kudos
Aivot
Sairaus
Neuroblastooma
Metastaasikohde
Vatsa
Synonyymit
IMR 32, IMR32, Institute for Medical Research-32, GM03320, GM3320C, GM03320D, AG03320, AG3320

Asiakirjat

IMR-32-solut

Cell line · Tuotenumero 300148

IMR-32 on ihmisen neuroblastoomasolulinja, joka on peräisin neuroblastoomadiagnoosin saaneen lapsen lisämunuaisen ytimestä. Neuroblastooma on pahanlaatuinen kasvain, joka on peräisin neu...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

IMR-32 on ihmisen neuroblastooma-solulinja, joka on peräisin sellaisen lapsen lisämunuaisydinytimestä, jolla on diagnosoitu neuroblastooma, pahanlaatuinen kasvain, joka on peräisin hermoruston soluista. Näillä soluilla on kypsymättömien hermosolujen ominaisuuksia, minkä vuoksi ne ovat arvokas malli hermosolujen erilaistumisen, neuroblastooman patogeneesin ja hermoston kehitysprosessien taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen. IMR-32-soluilla on suuri proliferaatiokapasiteetti, ja niillä on edelleen kyky syntetisoida katekoliamiineja, erityisesti dopamiinia ja noradrenaliinia, jotka ovat hermoston keskeisiä välittäjäaineita.

IMR-32-soluilla on diploidinen karyotyyppi, jossa on erityisiä neuroblastoomaan yleisesti liittyviä kromosomipoikkeavuuksia, kuten MYCN-onkogeenin monistuminen. Tämä ominaisuus tekee niistä erityisen hyödyllisiä neuroblastooman geneettisten ja molekulaaristen taustatekijöiden tutkimisessa, mukaan lukien MYCN:n rooli kasvainten synnyssä ja etenemisessä. Lisäksi IMR-32-soluja käytetään lääkeaineiden seulontamäärityksissä neuroblastoomaan kohdistuvien mahdollisten terapeuttisten aineiden tehokkuuden ja sytotoksisuuden arvioimiseksi. On kuitenkin tärkeää huomata, että nämä solut on tarkoitettu ainoastaan in vitro -tutkimustarkoituksiin eivätkä ne sovellu mihinkään terapeuttisiin tai in vivo -sovelluksiin.

Kudos
Aivot
Sairaus
Neuroblastooma
Metastaasikohde
Vatsa
Synonyymit
  • IMR 32
  • IMR32
  • Institute for Medical Research-32
  • GM03320
  • GM3320C
  • GM03320D
  • AG03320
  • AG3320

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Neuroblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
IMR-32 (Cytionin luettelonumero 300148)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0346

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
G6PD, B
Viruksille altistuminen
Vesicular stomatitis (Indiana), herpes simplex, vaccinia, coxsackievirus B3, poliovirus 3 (heikosti)
Virusten kestävyys
Echovirus 11
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
13 kuukautta
Etnisyys
Kaukasialainen