Przejdź do treści
Komórki IMR-32
Chusteczka
Mózg
Choroba
Neuroblastoma
Miejsce przerzutów
Brzuch
Synonimy
IMR 32, IMR32, Institute for Medical Research-32, GM03320, GM3320C, GM03320D, AG03320, AG3320

Dokumenty

Komórki IMR-32

Cell line · Numer produktu 300148

IMR-32 to ludzka linia komórkowa neuroblastoma, wyhodowana z rdzenia nadnerczy dziecka, u którego zdiagnozowano neuroblastoma – nowotwór złośliwy wywodzący się z komórek nerwowych...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

IMR-32 to ludzka linia komórek neuroblastoma pochodząca z rdzenia nadnerczy dziecka, u którego zdiagnozowano neuroblastoma, złośliwy nowotwór wywodzący się z komórek grzebienia nerwowego. Komórki te wykazują cechy niedojrzałych komórek neuronalnych, co czyni je cennym modelem do badania różnicowania neuronów, patogenezy nerwiaka niedojrzałego i mechanizmów molekularnych leżących u podstaw procesów neurorozwojowych. Komórki IMR-32 mają wysoką zdolność do proliferacji i zachowują zdolność do syntezy katecholamin, w szczególności dopaminy i noradrenaliny, które są niezbędnymi neuroprzekaźnikami w układzie nerwowym.

Komórki IMR-32 wykazują diploidalny kariotyp z określonymi aberracjami chromosomalnymi powszechnie związanymi z nerwiakiem niedojrzałym, takimi jak amplifikacja onkogenu MYCN. Cecha ta sprawia, że są one szczególnie przydatne w badaniach nad genetycznymi i molekularnymi czynnikami neuroblastomy, w tym rolą MYCN w nowotworzeniu i progresji. Ponadto komórki IMR-32 są wykorzystywane w testach przesiewowych leków w celu oceny skuteczności i cytotoksyczności potencjalnych środków terapeutycznych ukierunkowanych na nerwiaka niedojrzałego. Należy jednak pamiętać, że komórki te są przeznaczone wyłącznie do celów badawczych in vitro i nie nadają się do żadnych zastosowań terapeutycznych ani in vivo.

Chusteczka
Mózg
Choroba
Neuroblastoma
Miejsce przerzutów
Brzuch
Synonimy
  • IMR 32
  • IMR32
  • Institute for Medical Research-32
  • GM03320
  • GM3320C
  • GM03320D
  • AG03320
  • AG3320

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Neuroblast

04Identyfikatory

Źródło
IMR-32 (numer katalogowy Cytion 300148)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0346

05Ekspresja i podatność

Izoenzymy
G6PD, B
Podatność na wirusy
Pęcherzykowe zapalenie jamy ustnej (Indiana), opryszczka zwykła, krowianka, wirus Coxsackie B3, wirus polio 3 (słabo)
Odporność na wirusy
Echowirus 11
Transkryptaza odwrotna
Negatywny

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 do 5 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
13 miesięcy
Pochodzenie etniczne
Kaukaski