Přejít na obsah
Buňky IMR-32
Tkáň
Mozek
Nemoc
Neuroblastom
Místo metastázy
Břicho
Synonyma
IMR 32, IMR32, Institute for Medical Research-32, GM03320, GM3320C, GM03320D, AG03320, AG3320

Dokumenty

Buňky IMR-32

Cell line · Číslo výrobku 300148

IMR-32 je lidská buněčná linie neuroblastomu odvozená z dřeně nadledvin dítěte, u kterého byl diagnostikován neuroblastom, což je zhoubný nádor vznikající z neur...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

IMR-32 je lidská neuroblastomová buněčná linie odvozená z dřeně nadledvin dítěte s diagnózou neuroblastomu, zhoubného nádoru vycházejícího z buněk nervového hřebene. Tyto buňky vykazují vlastnosti nezralých neuronálních buněk, což z nich činí cenný model pro studium diferenciace neuronů, patogeneze neuroblastomu a molekulárních mechanismů, které jsou základem neurovývojových procesů. Buňky IMR-32 mají vysokou schopnost proliferace a zachovávají si schopnost syntetizovat katecholaminy, zejména dopamin a noradrenalin, které jsou základními neurotransmitery v nervovém systému.

Buňky IMR-32 vykazují diploidní karyotyp se specifickými chromozomálními aberacemi, které jsou běžně spojovány s neuroblastomem, jako je amplifikace onkogenu MYCN. Tato vlastnost je činí obzvláště užitečnými pro výzkum genetických a molekulárních příčin neuroblastomu, včetně úlohy MYCN v nádorovém bujení a progresi. Kromě toho se buňky IMR-32 využívají při testování léků pro hodnocení účinnosti a cytotoxicity potenciálních terapeutických látek zaměřených na neuroblastom. Je však nezbytné poznamenat, že tyto buňky jsou určeny výhradně pro výzkumné účely in vitro a nejsou vhodné pro jakékoli terapeutické nebo in vivo aplikace.

Tkáň
Mozek
Nemoc
Neuroblastom
Místo metastázy
Břicho
Synonyma
  • IMR 32
  • IMR32
  • Institute for Medical Research-32
  • GM03320
  • GM3320C
  • GM03320D
  • AG03320
  • AG3320

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Typ buňky
Neuroblast

04Identifikátory

Citace
IMR-32 (katalogové číslo Cytion 300148)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0346

05Exprese a náchylnost

Isoenzymy
G6PD, B
Náchylnost k virům
Vesikulární stomatitida (Indiana), herpes simplex, vakcína, coxsackievirus B3, poliovirus 3 (slabě)
Odolnost vůči virům
Echovirus 11
Reverzní transkriptáza
Negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
13 měsíců
Etnická příslušnost
Kavkazský