Mine otse sisu juurde
IMR-32 rakud
Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Kõhu
Sünonüümid
IMR 32, IMR32, Institute for Medical Research-32, GM03320, GM3320C, GM03320D, AG03320, AG3320

Dokumendid

IMR-32 rakud

Cell line · Toote number 300148

IMR-32 on inimese neuroblastoomi rakuliin, mis on saadud neuroblastoomiga diagnoositud lapse neerupealise südamikust; neuroblastoom on pahaloomuline kasvaja, mis pärineb neu...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

IMR-32 on inimese neuroblastoomi rakuliin, mis on saadud neuroblastoomi (närviraku rakkudest alguse saanud pahaloomuline kasvaja) diagnoosiga lapse neerukelmest. Nendel rakkudel on ebaküpsete neuronaalsete rakkude omadused, mis teeb neist väärtusliku mudeli neuronaalse diferentseerumise, neuroblastoomi patogeneesi ja neuroarenguprotsesside aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. IMR-32 rakkudel on suur proliferatsioonivõime ja nad säilitavad võime sünteesida katehhoolamiine, eelkõige dopamiini ja noradrenaliini, mis on närvisüsteemi olulised neurotransmitterid.

IMR-32 rakkudel on diploidne karüotüüp koos spetsiifiliste kromosoomiaberratsioonidega, mida tavaliselt seostatakse neuroblastoomiga, näiteks MYCN-onkogeeni amplifikatsioon. See omadus muudab nad eriti kasulikuks neuroblastoomi geneetiliste ja molekulaarsete tegurite, sealhulgas MYCNi rolli uurimiseks kasvaja tekkimisel ja progresseerumisel. Lisaks kasutatakse IMR-32 rakke ravimite sõeluuringutes, et hinnata neuroblastoomi vastu suunatud potentsiaalsete raviainete tõhusust ja tsütotoksilisust. Siiski on oluline märkida, et need rakud on mõeldud üksnes in vitro uuringute jaoks ning ei sobi terapeutilisteks või in vivo rakendusteks.

Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Kõhu
Sünonüümid
  • IMR 32
  • IMR32
  • Institute for Medical Research-32
  • GM03320
  • GM3320C
  • GM03320D
  • AG03320
  • AG3320

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Neuroblast

04Tunnused

Viide
IMR-32 (Cytioni katalooginumber 300148)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0346

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
G6PD, B
Viirusele vastuvõtlikkus
Vesikulaarstomatiit (Indiana), herpes simplex, vaktsiin, kooksackieviirus B3, polioviirus 3 (halvasti)
Viirusresistentsus
Echoviirus 11
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
13 kuud
Etniline kuuluvus
Kaukaasia