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Células IMR-32
Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Neuroblastoma
Lugar de metástasis
Abdomen
Sinónimos
IMR 32, IMR32, Institute for Medical Research-32, GM03320, GM3320C, GM03320D, AG03320, AG3320

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Células IMR-32

Cell line · Número de producto 300148

La IMR-32 es una línea celular de neuroblastoma humano derivada de la médula suprarrenal de un niño al que se le diagnosticó un neuroblastoma, un tumor maligno que se origina en las neuronas...

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01Información general

Descripción

IMR-32 es una línea celular de neuroblastoma humano derivada de la médula suprarrenal de un niño diagnosticado de neuroblastoma, un tumor maligno originado a partir de células de la cresta neural. Estas células presentan características de células neuronales inmaduras, lo que las convierte en un modelo valioso para estudiar la diferenciación neuronal, la patogénesis del neuroblastoma y los mecanismos moleculares subyacentes a los procesos de neurodesarrollo. Las células IMR-32 tienen una gran capacidad de proliferación y conservan la capacidad de sintetizar catecolaminas, en particular dopamina y norepinefrina, que son neurotransmisores esenciales en el sistema nervioso.

Las células IMR-32 presentan un cariotipo diploide con aberraciones cromosómicas específicas comúnmente asociadas al neuroblastoma, como la amplificación del oncogén MYCN. Esta característica las hace especialmente útiles para la investigación de los impulsores genéticos y moleculares del neuroblastoma, incluido el papel de MYCN en la tumorigénesis y la progresión. Además, las células IMR-32 se emplean en ensayos de cribado de fármacos para evaluar la eficacia y citotoxicidad de posibles agentes terapéuticos dirigidos al neuroblastoma. Sin embargo, es crucial señalar que estas células están destinadas únicamente a la investigación in vitro y no son adecuadas para ninguna aplicación terapéutica o in vivo.

Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Neuroblastoma
Lugar de metástasis
Abdomen
Sinónimos
  • IMR 32
  • IMR32
  • Institute for Medical Research-32
  • GM03320
  • GM3320C
  • GM03320D
  • AG03320
  • AG3320

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Neuroblastos

04Identificadores

Referencia
IMR-32 (número de catálogo 300148 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0346

05Expresión y susceptibilidad

Isoenzimas
G6PD, B
Susceptibilidad a los virus
Estomatitis vesicular (Indiana), herpes simple, vaccinia, coxsackievirus B3, poliovirus 3 (mal)
Resistencia a los virus
Ecovirus 11
Transcriptasa inversa
Negativo

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
Cada 3 a 5 días
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
13 meses
Origen étnico
Caucásico