Pāriet uz saturu
MHCC-97H-Luc
Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Dokumenti

MHCC-97H-Luc

Cell line · Preces numurs 305687

MHCC-97H-Luc is a bioluminescent derivative of the human MHCC-97H hepatocellular carcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase re...

€777.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MHCC-97H-Luc ir cilvēka MHCC-97H hepatocelulārās karcinomas šūnu līnijas bioluminiscējošs atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskrēsliņa luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā MHCC-97H šūnu līnija tika izveidota no 39 gadus veca ķīniešu vīrieša hepatocelulārās karcinomas un tai raksturīgs augsts metastāzēšanas potenciāls, ko atspoguļo tās klasifikācija kā MHCC97 sērijas augstas metastāzēšanas apakšlīnija. MHCC-97H šūnas ir saistītas ar B hepatīta vīrusa (HBV) transformāciju un izrāda agresīvu invazīvu uzvedību, tādējādi padarot tās par klīniski nozīmīgu modeli, lai pētītu augsti metastātisku hepatocelulāro karcinomu un terapeitiskās stratēģijas, kas vērstas pret invāziju un izplatīšanos.

Stabila luciferāzes integrācija MHCC-97H-Luc šūnās ļauj veikt jutīgu, neinvazīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI), novērtējot audzēja apjomu ortotopiskās aknu implantācijas un subkutāno ksenotransplantātu modeļos, izmantojot imūnsistēmas vājinātus saņēmējus. Izstarotais signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, kas ļauj ilgtermiņā novērot audzēja iesakņošanos, izplatīšanos aknās un attālās metastāzes. MHCC-97H-Luc ir īpaši vērtīgs in vivo novērtējumam pretmetastātiskajiem līdzekļiem, kināžu inhibitoriem un jaunām mērķtiecīgām terapijām pret ļoti invazīvu hepatocelulāro karcinomu, kā arī audzēja mikrovides mijiedarbības un HCC metastāžu pamatā esošo molekulāro mehānismu izpētei.

MHCC-97H-Luc saglabā augsto metastāzēšanas potenciālu un ar HBV saistītās molekulārās īpašības, kas raksturīgas sākotnējai MHCC-97H līnijai, nodrošinot atbilstošu un agresīvu pirmsklīnisko platformu aknu šūnu karcinomas pētījumiem. Luciferāzes reportera gēns uzlabo eksperimenta jutību un ļauj veikt farmakodinamisko novērtējumu reālajā laikā. Pētniekiem pirms plaša mēroga in vivo izmantošanas ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, metastāzēšanas īpašības un augšanas kinētika savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Hepatocītu līdzīgs
Tumorogēns
Augsts metastāzes potenciāls

04Identifikatori

Atsauce
MHCC-97H-Luc (Cytion kataloga numurs 305687)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
Vīrusi
Transformants: B hepatīta vīruss (HBV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
39 gadi
Etniskā piederība
Ķīniešu