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MHCC-97H-Luc
Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do adulto
Sinónimos
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Documentos

MHCC-97H-Luc

Cell line · Número do produto 305687

MHCC-97H-Luc is a bioluminescent derivative of the human MHCC-97H hepatocellular carcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase re...

€777.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

A MHCC-97H-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana MHCC-97H de carcinoma hepatocelular, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental MHCC-97H foi estabelecida a partir de um carcinoma hepatocelular num doente do sexo masculino chinês de 39 anos e caracteriza-se por um elevado potencial metastático, tal como refletido na sua designação como sublinha de alta metástase da série MHCC-97. As células MHCC-97H estão associadas à transformação pelo vírus da hepatite B (VHB) e apresentam um comportamento invasivo agressivo, o que as torna um modelo clinicamente relevante para o estudo do carcinoma hepatocelular altamente metastático e de estratégias terapêuticas direcionadas à invasão e à disseminação.

A integração estável da luciferase na MHCC-97H-Luc permite a obtenção de imagens por bioluminescência (BLI) sensíveis e não invasivas da carga tumoral em modelos de implantação ortotópica no fígado e de xenoenxertos subcutâneos utilizando hospedeiros imunocomprometidos. O sinal emitido está correlacionado com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal do enxerto tumoral, da disseminação intra-hepática e das metástases à distância. A linha MHCC-97H-Luc é particularmente valiosa para a avaliação in vivo de agentes antimetastáticos, inibidores de quinases e novas terapias direcionadas contra o carcinoma hepatocelular altamente invasivo, bem como para a investigação das interações no microambiente tumoral e dos mecanismos moleculares subjacentes à metástase do CHC.

O MHCC-97H-Luc mantém o elevado potencial metastático e as características moleculares associadas ao VHB da linha parental MHCC-97H, proporcionando uma plataforma pré-clínica relevante e agressiva para a investigação do carcinoma hepatocelular. O repórter de luciferase aumenta a sensibilidade experimental e permite a avaliação farmacodinâmica em tempo real. Os investigadores devem validar a atividade da luciferase, o comportamento metastático e a cinética de crescimento nas suas condições experimentais específicas antes da utilização in vivo em grande escala.

Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do adulto
Sinónimos
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Semelhante a um hepatócito
Tumorigénico
Elevado potencial metastático

04Identificadores

Referência
MHCC-97H-Luc (número de catálogo da Cytion 305687)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Luc2 (firefly, com codões otimizados)
Vírus
Transformante: vírus da hepatite B (VHB)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, w: 4,5 g/L Glicose, w: 4 mM L-Glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Piruvato de sódio
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
2-4*10⁴/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
39 anos
Etnia
Chinês