Pāriet uz saturu
MOLM-13
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Akūta mieloīdā leikēmija pieaugušajiem
Sinonīmi
MOLM13, Molm13, Molm 13

Dokumenti

MOLM-13

Cell line · Preces numurs 305393

The MOLM-13 cell line is a human acute myeloid leukemia (AML) cell line, originally derived from a patient diagnosed with AML-M5a (acute monocytic leukemi...

€500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MOLM-13 šūnu līnija ir cilvēka akūtas mieloīdās leikēmijas (AML) šūnu līnija, kas sākotnēji iegūta no pacienta, kuram diagnosticēta AML-M5a (akūta monocītiska leikēmija, FAB klasifikācija). Šī līnija tika izveidota slimības recidīva brīdī, pēc iepriekšējas mielodisplastiskā sindroma (MDS) progresēšanas. MOLM-13 šūnas satur MLL-AF9 gēnu fūziju, kas izveidojusies insersijas ins(11;9)(q23;p22p23) rezultātā, un tām ir papildu hromosomu anomālijas, piemēram, trisomija 8, kas ir bieži sastopama pazīme, kas saistīta ar AML.

Fenotipisko īpašību ziņā MOLM-13 šūnas ekspresē mieloīdo un monocītu saistītos marķierus, tostarp CD33, CD13 un CD15. Tomēr tām trūkst CD34 ekspresijas, kas ir hematopoētisko cilmes un priekšteču šūnu marķieris, kas atšķir tās no citiem leikēmijas apakštipiem. MOLM-13 šūnas arī uzrāda monoblastoīdu morfoloģiju ar smalku hromatīnu un izteiktiem nukleoliem. Funkcionāli tās spēj diferenciēties makrofāgu tipa šūnās, saskaroties ar specifiskiem citokīniem, piemēram, interferonu-gamma (IFN-γ) un audzēja nekrozes faktoru-alfa (TNF-α), kas arī pastiprina mielomonocītu marķieru ekspresiju.

MOLM-13 kalpo kā kritisks modelis leikemogēzes pētīšanai, jo īpaši MLL pārkārtojumu leikēmiju pamatā esošo mehānismu izpētei. Tas tiek plaši izmantots arī pirmsklīniskajos pētījumos, tostarp jaunu terapiju, piemēram, CD70-specifisko CAR-T šūnu, novērtēšanā, kuras ir parādījušas efektivitāti pret MOLM-13 in vitro un ksenotransplantātu modeļos. Tas padara MOLM-13 par nenovērtējamu instrumentu, lai pētītu mērķtiecīgas terapeitiskas pieejas augsta riska AML.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Akūta mieloīdā leikēmija pieaugušajiem
Sinonīmi
  • MOLM13
  • Molm13
  • Molm 13

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblastiem līdzīgs

04Identifikatori

Atsauce
MOLM-13 (Cytion kataloga numurs 305393)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2119

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
CD3 -, CD4 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, CD34 -, cy CD68 +, HLA-DR -
Mutāciju profils
Mutācija: FLT3, neeksplicīta, iekšēja tandēma dublikācija; Gēnu fūzija: KMT2A-MLLT3, MLL-MLLT3, MLL-AF9

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Sēšanas blīvums
Uzturiet kultūru starp 4 x 105 un 2 x 106 šūnām/ml.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
20 gadi
Etniskā piederība
Japāņu