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MOLM-13
Tecido
Sangue periférico
Doença
Leucemia mielóide aguda em adultos
Sinónimos
MOLM13, Molm13, Molm 13

Documentos

MOLM-13

Cell line · Número do produto 305393

The MOLM-13 cell line is a human acute myeloid leukemia (AML) cell line, originally derived from a patient diagnosed with AML-M5a (acute monocytic leukemi...

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Personalização / Recomendações

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular MOLM-13 é uma linha celular humana de leucemia mielóide aguda (LMA), originalmente derivada de um paciente diagnosticado com LMA-M5a (leucemia monocítica aguda, classificação FAB). Esta linha foi estabelecida no momento da recidiva da doença, após progressão prévia da síndrome mielodisplásica (SMD). As células MOLM-13 abrigam a fusão do gene MLL-AF9 resultante de uma inserção, ins(11;9)(q23;p22p23), e apresentam anomalias cromossómicas adicionais, como a trissomia 8, uma característica comum associada à LMA.

Em termos de características fenotípicas, as células MOLM-13 expressam marcadores mielóides e associados a monócitos, incluindo CD33, CD13 e CD15. No entanto, elas não expressam CD34, um marcador de células estaminais e progenitoras hematopoiéticas, o que as distingue de outros subtipos de leucemia. As células MOLM-13 também apresentam morfologia monoblastóide com cromatina fina e nucléolos proeminentes. Funcionalmente, são capazes de se diferenciar em células semelhantes a macrófagos após exposição a citocinas específicas, como interferão-gama (IFN-γ) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), que também aumentam a expressão de marcadores mielomonocíticos.

O MOLM-13 serve como um modelo crítico para o estudo da leucemogênese, particularmente dos mecanismos subjacentes às leucemias com rearranjo do MLL. Também é amplamente utilizado em pesquisas pré-clínicas, incluindo a avaliação de novas terapias, como células CAR-T específicas para CD70, que demonstraram eficácia contra o MOLM-13 in vitro e em modelos de xenoenxertos. Isso torna o MOLM-13 uma ferramenta inestimável para explorar abordagens terapêuticas direcionadas para a LMA de alto risco.

Tecido
Sangue periférico
Doença
Leucemia mielóide aguda em adultos
Sinónimos
  • MOLM13
  • Molm13
  • Molm 13

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo linfoblasto

04Identificadores

Referência
MOLM-13 (número de catálogo Cytion 305393)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2119

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
CD3-, CD4+, CD14-, CD15+, CD19-, CD33+, CD34-, cy CD68+, HLA-DR-
Perfil mutacional
Mutação: FLT3, não explícita, duplicação interna em tandem; Fusão genética: KMT2A-MLLT3, MLL-MLLT3, MLL-AF9

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Densidade de sementeira
Mantenha a cultura entre 4 x 105 e 2 x 106 células/mL
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
20 anos
Etnia
Japonês