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MOLM-13
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia mieloide acuta dell'adulto
Sinonimi
MOLM13, Molm13, Molm 13

Documenti

MOLM-13

Cell line · Codice prodotto 305393

The MOLM-13 cell line is a human acute myeloid leukemia (AML) cell line, originally derived from a patient diagnosed with AML-M5a (acute monocytic leukemi...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MOLM-13 è una linea cellulare umana di leucemia mieloide acuta (AML), originariamente derivata da un paziente con diagnosi di AML-M5a (leucemia monocitica acuta, classificazione FAB). Questa linea è stata creata al momento della recidiva della malattia, in seguito alla precedente progressione dalla sindrome mielodisplastica (MDS). Le cellule MOLM-13 ospitano la fusione genica MLL-AF9 risultante da un inserimento, ins(11;9)(q23;p22p23), e presentano ulteriori anomalie cromosomiche come la trisomia 8, una caratteristica comune associata all'AML.

In termini di caratteristiche fenotipiche, le cellule MOLM-13 esprimono marcatori mieloidi e associati ai monociti, tra cui CD33, CD13 e CD15. Tuttavia, non esprimono CD34, un marcatore delle cellule staminali e progenitrici ematopoietiche, che le distingue da altri sottotipi di leucemia. Le cellule MOLM-13 presentano anche una morfologia monoblastica con cromatina fine e nucleoli prominenti. Dal punto di vista funzionale, sono in grado di differenziarsi in cellule simili ai macrofagi dopo l'esposizione a specifiche citochine come l'interferone gamma (IFN-γ) e il fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-α), che aumentano anche l'espressione dei marcatori mielomonocitici.

MOLM-13 funge da modello fondamentale per lo studio della leucemogenesi, in particolare dei meccanismi alla base delle leucemie con riarrangiamento MLL. È anche ampiamente utilizzato nella ricerca preclinica, compresa la valutazione di nuove terapie come le cellule CAR-T specifiche per CD70, che hanno dimostrato efficacia contro MOLM-13 in vitro e in modelli di xenotrapianto. Ciò rende MOLM-13 uno strumento prezioso per esplorare approcci terapeutici mirati per la LMA ad alto rischio.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia mieloide acuta dell'adulto
Sinonimi
  • MOLM13
  • Molm13
  • Molm 13

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto-simile

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MOLM-13 (numero di catalogo Cytion 305393)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2119

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
CD3 -, CD4 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, CD34 -, cy CD68 +, HLA-DR -
Profilo mutazionale
Mutazione: FLT3, non esplicita, duplicazione tandem interna; Fusione genica: KMT2A-MLLT3, MLL-MLLT3, MLL-AF9

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Densità di semina
Mantenere la coltura tra 4 x 105 e 2 x 106 cellule/mL
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
20 anni
Etnia
Giapponese