Ga naar de inhoud
AtT-20
Weefsel
Hypofyse
Ziekte
Hypofyse neoplasma's bij de muis
Synoniemen
AtT20, AtT 20, ATT-20

Documenten

AtT-20

Cell line · Productnummer 305161

The AtT-20 cell line is a well-characterized mouse pituitary tumor cell line derived from anterior pituitary cells. These cells originate from a strain of...

€650.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De AtT-20 cellijn is een goed gekarakteriseerde muizenhypofysetumorcellijn afgeleid van voorste hypofysecellen. Deze cellen zijn afkomstig van een muizenstam die bekend staat als AtT-20/D16v-F2, en worden voornamelijk gebruikt voor het bestuderen van de hypofysefunctie en -regulatie, waarbij de nadruk ligt op de synthese en secretie van adrenocorticotroop hormoon (ACTH). ACTH is cruciaal voor de bijnierfunctie en speelt een sleutelrol in de stressrespons en metabolische regulatie.

AtT-20 cellen vertonen typische kenmerken die van belang zijn voor studies in neuro-endocrinologie en farmacologie, zoals de productie en secretie van pro-opiomelanocortine (POMC), de precursormolecule voor ACTH. De cellen reageren op corticotropine-releasing hormoon (CRH) en andere hypothalamushormonen, waardoor ze een uitstekend model zijn om de hypothalamus-hypofyse-bijnieras (HPA-as) in vitro te onderzoeken. Bovendien kunnen AtT-20 cellen gebruikt worden om de mechanismen van de verwerking, verpakking en secretie van peptidehormonen te onderzoeken, gezien hun goed gedefinieerde secretieroutes.

In termen van toepassingen zijn AtT-20 cellen gebruikt in verschillende onderzoeken, waaronder onderzoeken naar genexpressieprofielen onder verschillende behandelingscondities, intracellulaire signaalroutes waarbij cAMP betrokken is en de effecten van genetische modificaties op hormoonsecretie. Deze cellen zijn ook waardevol bij de beoordeling van de farmacologische eigenschappen van potentiële kandidaat-geneesmiddelen die gericht zijn op componenten van de HPA-as.

Weefsel
Hypofyse
Ziekte
Hypofyse neoplasma's bij de muis
Synoniemen
  • AtT20
  • AtT 20
  • ATT-20

02Classificatie

Organisme
Muis
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Kleine afgeronde cellen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
AtT-20 (Cytion catalogusnummer 305161)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_2300

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Adrenocorticotroop hormoon (Acth)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Ham's F12K-medium, w: 2,0 mM L-glutamine, w: 2,0 mM natriumpyruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion-artikelnummer 820608a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 2,5% FBS, 15% paardenserum
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Onderhoud de culturen door het medium periodiek toe te voegen of te vervangen. Start de culturen met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 3 x 105 tot 1 x 106 cellen/ml voor een optimale groei.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
LAF1