Prejsť na obsah
AtT-20
Tkanivo
Hypofýza
Choroba
Novotvary myšej hypofýzy
Synonymá
AtT20, AtT 20, ATT-20

Dokumenty

AtT-20

Cell line · Číslo výrobku 305161

The AtT-20 cell line is a well-characterized mouse pituitary tumor cell line derived from anterior pituitary cells. These cells originate from a strain of...

€650.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia AtT-20 je dobre charakterizovaná nádorová bunková línia myšej hypofýzy odvodená z buniek prednej hypofýzy. Tieto bunky pochádzajú z kmeňa myší známeho ako AtT-20/D16v-F2 a používajú sa predovšetkým na štúdium funkcie a regulácie hypofýzy, najmä so zameraním na syntézu a sekréciu adrenokortikotropného hormónu (ACTH). ACTH je rozhodujúci pre funkciu nadobličiek a je kľúčovým hráčom v stresovej reakcii a regulácii metabolizmu.

Bunky AtT-20 vykazujú typické vlastnosti významné pre štúdie v neuroendokrinológii a farmakológii, ako je produkcia a sekrécia proopiomelanokortínu (POMC), prekurzorovej molekuly pre ACTH. Bunky reagujú na kortikotropín uvoľňujúci hormón (CRH) a iné hypotalamické hormóny, čo z nich robí vynikajúci model na skúmanie osi hypotalamus-hypofýza-nadobličky (HPA) in vitro. Okrem toho sa bunky AtT-20 môžu použiť na skúmanie mechanizmov spracovania, balenia a vylučovania peptidových hormónov vzhľadom na ich dobre definované sekrečné dráhy.

Pokiaľ ide o aplikácie, bunky AtT-20 sa využívajú v rôznych štúdiách vrátane štúdií zameraných na profily expresie génov za rôznych podmienok liečby, vnútrobunkové signálne dráhy zahŕňajúce cAMP a účinky genetických modifikácií na sekréciu hormónov. Tieto bunky sú tiež cenné pri hodnotení farmakologických vlastností potenciálnych kandidátov na lieky zamerané na zložky osi HPA.

Tkanivo
Hypofýza
Choroba
Novotvary myšej hypofýzy
Synonymá
  • AtT20
  • AtT 20
  • ATT-20

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Malé zaoblené bunky

04Identifikátory

Citácia
AtT-20 (katalógové číslo Cytion 305161)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2300

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Adrenokortikotropný hormón (Acth)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Hamovo médium F12K, w: 2,0 mM L-glutamín, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,5 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820608a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 2,5 % FBS, 15 % konského séra
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
LAF1