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AtT-20
Tessuto
Ipofisi
Malattia
Neoplasie dell'ipofisi nel topo
Sinonimi
AtT20, AtT 20, ATT-20

Documenti

AtT-20

Cell line · Codice prodotto 305161

The AtT-20 cell line is a well-characterized mouse pituitary tumor cell line derived from anterior pituitary cells. These cells originate from a strain of...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare AtT-20 è una linea cellulare tumorale ipofisaria di topo ben caratterizzata, derivata da cellule ipofisarie anteriori. Queste cellule provengono da un ceppo di topi noto come AtT-20/D16v-F2 e sono utilizzate principalmente per lo studio della funzione e della regolazione ipofisaria, con particolare attenzione alla sintesi e alla secrezione dell'ormone adrenocorticotropo (ACTH). L'ACTH è fondamentale per la funzione della ghiandola surrenale ed è un attore chiave nella risposta allo stress e nella regolazione metabolica.

Le cellule AtT-20 presentano caratteristiche tipiche significative per gli studi di neuroendocrinologia e farmacologia, come la produzione e la secrezione di pro-opiomelanocortina (POMC), la molecola precursore dell'ACTH. Le cellule rispondono all'ormone di rilascio della corticotropina (CRH) e ad altri ormoni ipotalamici, il che le rende un modello eccellente per esplorare l'asse ipotalamo-ipofisi-surrene (HPA) in vitro. Inoltre, le cellule AtT-20 possono essere utilizzate per studiare i meccanismi di elaborazione, confezionamento e secrezione degli ormoni peptidici, grazie alle loro vie secretorie ben definite.

In termini di applicazioni, le cellule AtT-20 sono state utilizzate in vari studi, tra cui quelli incentrati sui profili di espressione genica in diverse condizioni di trattamento, sulle vie di segnalazione intracellulare che coinvolgono il cAMP e sugli effetti delle modifiche genetiche sulla secrezione ormonale. Queste cellule sono anche preziose per la valutazione delle proprietà farmacologiche di potenziali candidati farmaci che hanno come bersaglio i componenti dell'asse HPA.

Tessuto
Ipofisi
Malattia
Neoplasie dell'ipofisi nel topo
Sinonimi
  • AtT20
  • AtT 20
  • ATT-20

02Classificazione

Organismo
Mouse
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Piccole cellule arrotondate

04Identificatori

Riferimento bibliografico
AtT-20 (numero di catalogo Cytion 305161)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2300

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Ormone adrenocorticotropo (Acth)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutammina, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,5 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820608a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con FBS al 2,5%, siero di cavallo al 15%
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
LAF1