Přejít na obsah
AtT-20
Tkáň
Hypofýza
Nemoc
Novotvary myší hypofýzy
Synonyma
AtT20, AtT 20, ATT-20

Dokumenty

AtT-20

Cell line · Číslo výrobku 305161

The AtT-20 cell line is a well-characterized mouse pituitary tumor cell line derived from anterior pituitary cells. These cells originate from a strain of...

€650.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie AtT-20 je dobře charakterizovaná buněčná linie nádorů myší hypofýzy odvozená z buněk přední hypofýzy. Tyto buňky pocházejí z kmene myší známého jako AtT-20/D16v-F2 a používají se především ke studiu funkce a regulace hypofýzy, zejména se zaměřením na syntézu a sekreci adrenokortikotropního hormonu (ACTH). ACTH má zásadní význam pro funkci nadledvinek a je klíčovým hráčem v reakci na stres a regulaci metabolismu.

Buňky AtT-20 vykazují typické vlastnosti významné pro studium v neuroendokrinologii a farmakologii, jako je produkce a sekrece proopiomelanokortinu (POMC), prekurzorové molekuly pro ACTH. Buňky reagují na kortikotropin uvolňující hormon (CRH) a další hypotalamické hormony, což z nich činí vynikající model pro zkoumání osy hypotalamus-hypofýza-nadledviny (HPA) in vitro. Kromě toho lze buňky AtT-20 použít ke zkoumání mechanismů zpracování, balení a vylučování peptidových hormonů vzhledem k jejich dobře definovaným sekrečním drahám.

Z hlediska aplikací byly buňky AtT-20 využity v různých studiích, včetně studií zaměřených na profily genové exprese za různých podmínek léčby, intracelulární signální dráhy zahrnující cAMP a účinky genetických modifikací na sekreci hormonů. Tyto buňky jsou také cenné při hodnocení farmakologických vlastností potenciálních kandidátů na léčiva zaměřená na složky osy HPA.

Tkáň
Hypofýza
Nemoc
Novotvary myší hypofýzy
Synonyma
  • AtT20
  • AtT 20
  • ATT-20

02Klasifikace

Organismus
Myš
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Malé zaoblené buňky

04Identifikátory

Citace
AtT-20 (katalogové číslo Cytion 305161)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2300

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Adrenokortikotropní hormon(Acth)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Pyruvát sodný, w: 2,5 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820608a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 2,5 % FBS, 15 % koňského séra
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Kultury udržujte pravidelným přidáváním nebo výměnou média. Zahajte kultury s hustotou 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk v rozmezí 3 x 105 až 1 x 106 buněk/ml.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
LAF1