Mine otse sisu juurde
AtT-20
Kude
Hüpofüüsi
Haigus
Hiirte hüpofüüsi neoplasmad
Sünonüümid
AtT20, AtT 20, ATT-20

Dokumendid

AtT-20

Cell line · Toote number 305161

The AtT-20 cell line is a well-characterized mouse pituitary tumor cell line derived from anterior pituitary cells. These cells originate from a strain of...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

AtT-20 rakuliin on hästi iseloomustatud hiire hüpofüüsi eesmise ajuripatsi rakuliin, mis on saadud eesmise ajuripatsi rakkudest. Need rakud pärinevad hiirte tüvest AtT-20/D16v-F2 ja neid kasutatakse peamiselt hüpofüüsi funktsiooni ja regulatsiooni uurimiseks, keskendudes eelkõige adrenokortikotroopse hormooni (ACTH) sünteesile ja sekretsioonile. ACTH on neerupealise funktsiooni jaoks ülioluline ning mängib olulist rolli stressireaktsioonis ja ainevahetuse reguleerimises.

AtT-20 rakkudel on neuroendokrinoloogia ja farmakoloogia uuringute jaoks olulised tüüpilised omadused, näiteks ACTH eellaste molekuli pro-opiomelanokortiini (POMC) tootmine ja sekretsioon. Rakud reageerivad kortikotropiini vabastavale hormoonile (CRH) ja teistele hüpotalamuse hormoonidele, mis teeb neist suurepärase mudeli hüpotalamuse-hüpofüüsi-neerupealise (HPA) telje uurimiseks in vitro. Lisaks saab AtT-20 rakke kasutada peptiidhormoonide töötlemise, pakendamise ja sekretsiooni mehhanismide uurimiseks, arvestades nende hästi määratletud sekretsiooniradu.

Rakenduste osas on AtT-20 rakke kasutatud mitmesugustes uuringutes, sealhulgas uuringutes, mis keskenduvad geeniekspressiooniprofiilidele erinevates töötlemistingimustes, rakusisestele signaaliradadele, mis hõlmavad cAMPi, ja geneetiliste modifikatsioonide mõjule hormoonide sekretsioonile. Need rakud on väärtuslikud ka HPA-telje komponentidele suunatud potentsiaalsete ravimikandidaatide farmakoloogiliste omaduste hindamisel.

Kude
Hüpofüüsi
Haigus
Hiirte hüpofüüsi neoplasmad
Sünonüümid
  • AtT20
  • AtT 20
  • ATT-20

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Väikesed ümarad rakud

04Tunnused

Viide
AtT-20 (Cytioni katalooginumber 305161)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_2300

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Adrenokortikotroopne hormoon (Acth)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820608a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 2,5% FBS, 15% hobuse seerumit
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
LAF1