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AtT-20
Tecido
Pituitária
Doença
Neoplasias da glândula pituitária do ratinho
Sinónimos
AtT20, AtT 20, ATT-20

Documentos

AtT-20

Cell line · Número do produto 305161

The AtT-20 cell line is a well-characterized mouse pituitary tumor cell line derived from anterior pituitary cells. These cells originate from a strain of...

€650.00sem impostos nem portes de envio
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01Informações gerais

Descrição

A linha celular AtT-20 é uma linha celular tumoral hipofisária de ratinho bem caracterizada, derivada de células da pituitária anterior. Estas células são originárias de uma estirpe de ratinhos conhecida como AtT-20/D16v-F2 e são utilizadas principalmente para o estudo da função e regulação hipofisária, centrando-se especialmente na síntese e secreção da hormona adrenocorticotrópica (ACTH). A ACTH é crucial para a função da glândula suprarrenal e é um elemento-chave na resposta ao stress e na regulação metabólica.

As células AtT-20 apresentam caraterísticas típicas importantes para estudos em neuroendocrinologia e farmacologia, tais como a produção e secreção de pro-opiomelanocortina (POMC), a molécula precursora da ACTH. As células respondem à hormona libertadora de corticotropina (CRH) e a outras hormonas hipotalâmicas, o que as torna um excelente modelo para explorar o eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA) in vitro. Além disso, as células AtT-20 podem ser utilizadas para investigar os mecanismos de processamento, embalagem e secreção de hormonas peptídicas, dadas as suas vias secretoras bem definidas.

Em termos de aplicações, as células AtT-20 têm sido utilizadas em vários estudos, incluindo os que se centram nos perfis de expressão genética em diferentes condições de tratamento, nas vias de sinalização intracelular que envolvem o AMPc e nos efeitos de modificações genéticas na secreção hormonal. Estas células são também valiosas na avaliação das propriedades farmacológicas de potenciais candidatos a fármacos que visam componentes do eixo HPA.

Tecido
Pituitária
Doença
Neoplasias da glândula pituitária do ratinho
Sinónimos
  • AtT20
  • AtT 20
  • ATT-20

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células pequenas e arredondadas

04Identificadores

Referência
AtT-20 (número de catálogo da Cytion 305161)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2300

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Hormona adrenocorticotrópica (Acth)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12K Medium, com: 2,0 mM L-Glutamina, com: 2,0 mM Piruvato de sódio, com: 2,5 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820608a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 2,5% de FBS, 15% de soro de cavalo
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Mantenha as culturas adicionando ou substituindo periodicamente o meio. Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 105 células/ml e mantenha a concentração celular dentro da faixa de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para um crescimento ideal.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
LAF1