B-LCL-HROC59

B-LCL-HROC59 to linia komórek limfoblastycznych B człowieka, unieśmiertelniona wirusem Epsteina-Barra (EBV), wyhodowana z komórek B infiltrujących nowotwór (TiBc) izolowanych z pierwotnego raka jelita grubego oznaczonego jako HROC59. Nowotwór macierzysty został wycięty u dorosłego mężczyzny z prawostronnym sporadycznym rakiem jelita grubego w zaawansowanym stadium. Świeżą tkankę nowotworową rozdzielono mechanicznie w celu uzyskania zawiesiny pojedynczych komórek, a komórki B selektywnie unieśmiertelniono in vitro przy użyciu supernatantu zawierającego wirusa EBV pochodzącego z linii komórkowej B95/8 marmozety w obecności cyklosporyny A w celu zahamowania ekspansji komórek T i NK. Długotrwała hodowla doprowadziła do stabilnego wzrostu populacji komórek B monoklonalnych, co wykazała analiza rearanżacji genów immunoglobulin.

B-LCL-HROC59 wydziela immunoglobulinę G (IgG) jako swój wyłączny izotyp, wykazując stabilną produkcję podczas długotrwałej hodowli. W testach wiązania opartych na komórkach IgG pochodząca z B-LCL-HROC59 wykazała jedynie minimalne wiązanie z badanymi allogenicznymi liniami komórkowymi raka jelita grubego w porównaniu z innymi IgG pochodzącymi z TiBc, wykazującymi silniejszą reaktywność komórek nowotworowych. Nie zaobserwowano żadnych dowodów spontanicznego wzrostu komórek B w przypadku braku egzogennego wirusa EBV podczas ustanawiania hodowli, co wskazuje, że unieśmiertelnienie nastąpiło in vitro, a nie odzwierciedlało utajoną transformację wywołaną przez wirusa EBV in vivo. Jako monoklonalna, doświadczona antygenowo linia komórek B infiltrujących nowotwór, B-LCL-HROC59 stanowi określony model do badania humoralnych odpowiedzi immunologicznych w mikrośrodowisku raka jelita grubego oraz do badania specyficzności i właściwości funkcjonalnych przeciwciał związanych z nowotworem.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym