B-LCL-HROC59

Το B-LCL-HROC59 είναι μια αθανατοποιημένη με τον ιό Epstein-Barr (EBV) ανθρώπινη κυτταρική σειρά Β λεμφοβλαστικών κυττάρων που παράγεται από Β κύτταρα που διεισδύουν σε όγκους (TiBc) που απομονώθηκαν από ένα πρωτοπαθές καρκίνωμα του παχέος εντέρου με την ονομασία HROC59. Ο γονικός όγκος αφαιρέθηκε από έναν ενήλικα άνδρα ασθενή με σποραδικό καρκίνωμα του παχέος εντέρου στη δεξιά πλευρά και νόσο σε προχωρημένο στάδιο. Ο φρέσκος όγκος διαχωρίστηκε μηχανικά για να ληφθούν εναιωρήματα μονών κυττάρων και τα Β κύτταρα αθανατοποιήθηκαν επιλεκτικά in vitro χρησιμοποιώντας υπερκείμενο που περιείχε EBV και προέρχονταν από την κυτταρική σειρά B95/8 marmoset παρουσία κυκλοσπορίνης Α για την καταστολή της επέκτασης των Τ και ΝΚ κυττάρων. Η μακροχρόνια καλλιέργεια είχε ως αποτέλεσμα τη σταθερή ανάπτυξη ενός μονοκλωνικού πληθυσμού Β κυττάρων, όπως αποδείχθηκε από την ανάλυση αναδιάταξης του γονιδίου της ανοσοσφαιρίνης.

Το B-LCL-HROC59 εκκρίνει ανοσοσφαιρίνη G (IgG) ως αποκλειστικό ισοτύπο, με σταθερή παραγωγή κατά τη διάρκεια παρατεταμένης καλλιέργειας. Σε δοκιμές σύνδεσης με βάση τα κύτταρα, η IgG που προέρχεται από το B-LCL-HROC59 έδειξε μόνο ελάχιστη σύνδεση με τις δοκιμασμένες αλλογενείς κυτταρικές σειρές καρκίνου του παχέος εντέρου σε σύγκριση με άλλες IgG που προέρχονται από TiBc και παρουσιάζουν ισχυρότερη αντιδραστικότητα των καρκινικών κυττάρων. Δεν παρατηρήθηκαν ενδείξεις αυθόρμητης ανάπτυξης Β-κυττάρων απουσία εξωγενούς EBV κατά τη διάρκεια της καλλιέργειας, υποδηλώνοντας ότι η αθανατοποίηση συνέβη in vitro και δεν αντανακλούσε λανθάνουσα μετασχηματισμό που προκαλείται από EBV in vivo. Ως μονοκλωνική, αντιγονικά έμπειρη σειρά Β-κυττάρων που διεισδύουν σε όγκους, η B-LCL-HROC59 παρέχει ένα καθορισμένο μοντέλο για τη μελέτη των χυμικών ανοσολογικών αποκρίσεων στο μικροπεριβάλλον του καρκίνου του παχέος εντέρου και για τη διερεύνηση της ειδικότητας και των λειτουργικών ιδιοτήτων των αντισωμάτων που σχετίζονται με τον όγκο.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης