B-LCL-HROC59

B-LCL-HROC59, HROC59 olarak adlandırılan birincil kolorektal karsinomdan izole edilen tümör infiltre edici B hücrelerinden (TiBc) üretilen, Epstein-Barr virüsü (EBV) ile ölümsüzleştirilmiş bir insan B lenfoblastoid hücre hattıdır. Ana tümör, sağ tarafta sporadik kolorektal karsinom ve ileri evre hastalığı olan yetişkin bir erkek hastadan rezeke edilmiştir. Taze tümör dokusu, tek hücreli süspansiyonlar elde etmek için mekanik olarak ayrıştırılmış ve B hücreleri, T ve NK hücrelerinin çoğalmasını bastırmak için siklosporin A varlığında B95/8 marmoset hücre hattından elde edilen EBV içeren süpernatant kullanılarak in vitro olarak seçici bir şekilde ölümsüzleştirilmiştir. Uzun süreli kültür, immünoglobulin gen yeniden düzenleme analizi ile gösterildiği gibi, monoklonal B hücre popülasyonunun stabil bir şekilde büyümesine neden olmuştur.

B-LCL-HROC59, uzun süreli kültürde stabil üretim ile immünoglobulin G (IgG) 'yi özel izotipi olarak salgılar. Hücre bazlı bağlanma testlerinde, B-LCL-HROC59'dan elde edilen IgG, daha güçlü tümör hücresi reaktivitesi gösteren diğer TiBc kaynaklı IgG'lere kıyasla, test edilen allojenik kolorektal karsinom hücre hatlarına sadece minimal bağlanma gösterdi. Kültür kurulumu sırasında ekzojen EBV yokluğunda spontan B hücresi büyümesi kanıtı gözlemlenmemiştir, bu da ölümsüzleşmenin in vivo latent EBV kaynaklı transformasyonu yansıtmak yerine in vitro gerçekleştiğini göstermektedir. Monoklonal, antijen deneyimli tümör infiltre edici B hücresi hattı olan B-LCL-HROC59, kolorektal kanser mikroçevresi içinde humoral bağışıklık tepkilerini incelemek ve tümörle ilişkili antikorların özgüllüğünü ve fonksiyonel özelliklerini araştırmak için tanımlanmış bir model sunar.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın