B-LCL-HROC59

B-LCL-HROC59 ir Epšteina-Barra vīrusa (EBV) imortalizēta cilvēka B limfoblastoīdu šūnu līnija, kas iegūta no audzēja infiltrējošām B šūnām (TiBc), kas izdalītas no primārā kolorektālā karcinoma, kas apzīmēts kā HROC59. Mātes audzējs tika izgriezts no pieaugušam vīriešu pacientam ar labās puses sporādisku kolorektālo karcinomu un slimības progresējošu stadiju. Svaigs audzēja audi tika mehāniski sadalīti, lai iegūtu vienšūnu suspensijas, un B šūnas tika selektīvi imortalizētas in vitro, izmantojot EBV saturošu supernatantu, kas iegūts no B95/8 marmoset šūnu līnijas, klātbūtnē ciklosporīna A, lai nomāktu T un NK šūnu izplatīšanos. Ilgtermiņa kultivēšana rezultējās stabilā monoklonālo B šūnu populācijas izaugsmē, kā to pierāda imūnglobulīna gēna pārkārtojuma analīze.

B-LCL-HROC59 izdalīja imūnglobulīnu G (IgG) kā savu ekskluzīvo izotipu, ar stabilu ražošanu ilgstošas kultivēšanas laikā. Šūnu saistīšanās testos IgG, kas iegūts no B-LCL-HROC59, parādīja tikai minimālu saistīšanos ar testētajām alogēnajām kolorektālās karcinomas šūnu līnijām salīdzinājumā ar citiem TiBc iegūtiem IgG, kas parādīja spēcīgāku audzēja šūnu reaktivitāti. Kultūras izveides laikā bez eksogēna EBV klātbūtnes netika novērota spontāna B šūnu izaugsme, kas liecina, ka imortalizācija notika in vitro, nevis atspoguļoja latentas EBV izraisītas transformācijas in vivo. Kā monoklonāla, antigēnu pieredzējusi audzēju infiltrējoša B šūnu līnija, B-LCL-HROC59 nodrošina definētu modeli humoro imūnreakciju pētīšanai kolorektālā vēža mikroapvidū un audzēju saistīto antivielu specifiskuma un funkcionālo īpašību izpētei.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu