B-LCL-HROC59

B-LCL-HROC59 是一種由愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV）使之永生化的人類 B 淋巴母細胞樣細胞系，源自一例編號為 HROC59 的原發性結直腸癌中分離出的腫瘤浸潤性 B 細胞（TiBc）。 該原發性腫瘤取自一名患有右側散發性結直腸癌且處於晚期階段的成年男性患者。 將新鮮腫瘤組織經機械性分離以獲得單細胞懸浮液，並在環孢素 A 的存在下，利用源自 B95/8 狨猴細胞系的含 EBV 上清液，於體外選擇性地將 B 細胞永生化，以抑制 T 細胞和 NK 細胞的擴增。 免疫球蛋白基因重排分析顯示，長期培養導致單克隆 B 細胞群的穩定增殖。

B-LCL-HROC59 分泌的唯一同型免疫球蛋白為免疫球蛋白 G（IgG），且在長期培養過程中能穩定產生。 在基於細胞的結合試驗中，與其他展現更強腫瘤細胞反應性的 TiBc 衍生 IgG 相比，源自 B-LCL-HROC59 的 IgG 對受測的同種異體結直腸癌細胞系的結合性極低。 在建立培養系統的過程中，若無外源性EBV存在，則未觀察到自發性B細胞增殖的跡象，這表明不朽化是在體外發生的，而非反映體內潛伏性EBV驅動的轉化。 作為一種單克隆、曾接觸抗原的腫瘤浸潤性 B 細胞系，B-LCL-HROC59 提供了一個明確的模型，可用於研究結直腸癌微環境中的體液免疫反應，以及探究腫瘤相關抗體的特異性與功能特性。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。