B-LCL-HROC59

B-LCL-HROC59 adalah garis sel limfoblastoid B manusia yang diimortalkan oleh virus Epstein-Barr (EBV), dihasilkan dari sel B yang menembus tumor (TiBc) yang diisolasi dari karsinoma kolorektal primer yang diberi label HROC59. Tumor induk diangkat dari pasien laki-laki dewasa dengan karsinoma kolorektal sporadis sisi kanan dan penyakit stadium lanjut. Jaringan tumor segar dipisahkan secara mekanis untuk mendapatkan suspensi sel tunggal, dan sel B diimortalkan secara selektif in vitro menggunakan supernatant yang mengandung EBV dari garis sel marmoset B95/8, dengan penambahan cyclosporin A untuk menekan perluasan sel T dan NK. Budidaya jangka panjang menghasilkan pertumbuhan stabil populasi sel B monoklonal, seperti yang ditunjukkan oleh analisis pengaturan gen imunoglobulin.

B-LCL-HROC59 menghasilkan imunoglobulin G (IgG) sebagai isotype eksklusifnya, dengan produksi stabil selama kultur jangka panjang. Dalam uji ikatan seluler, IgG yang dihasilkan oleh B-LCL-HROC59 menunjukkan ikatan minimal terhadap garis sel karsinoma kolorektal alogenik yang diuji, dibandingkan dengan IgG lain yang dihasilkan dari TiBc yang menunjukkan reaktivitas sel tumor yang lebih kuat. Tidak ada bukti pertumbuhan spontan sel B yang diamati dalam kultur tanpa EBV eksogen selama pembentukan kultur, menunjukkan bahwa imortalitas terjadi in vitro daripada mencerminkan transformasi laten yang didorong oleh EBV in vivo. Sebagai garis sel B infiltran tumor monoklonal yang telah terpapar antigen, B-LCL-HROC59 menyediakan model yang terdefinisi untuk mempelajari respons imun humoral dalam mikro lingkungan kanker kolorektal dan untuk menyelidiki spesifisitas dan sifat fungsional antibodi yang terkait dengan tumor.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami