B-LCL-HROC59

B-LCL-HROC59 เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ของมนุษย์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วยไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) ซึ่งสร้างขึ้นจากเซลล์บีลิมโฟบลาสต์ที่แทรกซึมในเนื้องอก (TiBc) ที่แยกได้จากมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดปฐมภูมิที่เรียกว่า HROC59 เซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์ไลน์นี้ถูกตัดออกจากเนื้องอกในผู้ป่วยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชายวัยผู้ใหญ่ที่มีมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดไม่ทราบสาเหตุทางด้านขวาและอยู่ในระยะลุกลาม เนื้อเยื่อเนื้องอกสดถูกแยกออกด้วยวิธีทางกลเพื่อให้ได้สารแขวนลอยเซลล์เดี่ยว และเซลล์บีถูกทำให้เป็นอมตะแบบเลือกสรรในหลอดทดลองโดยใช้สารซูเปอร์นาแทนต์ที่มีเชื้อ EBV ซึ่งสกัดจากสายเซลล์ B95/8 ของลิงมาร์โมเซต ร่วมกับไซโคลสปอรินเอเพื่อยับยั้งการขยายตัวของเซลล์ทีและเซลล์เอ็นเค การเพาะเลี้ยงในระยะยาวส่งผลให้เกิดการเจริญเติบโตของประชากรเซลล์บีชนิดโคลนเดียวอย่างคงที่ ซึ่งแสดงให้เห็นได้จากการวิเคราะห์การจัดเรียงลำดับยีนของอิมมูโนโกลบูลิน

B-LCL-HROC59 ผลิตอิมมูโนโกลบูลิน G (IgG) เป็นไอโซไทป์เฉพาะ โดยมีปริมาณการผลิตที่คงที่ตลอดการเพาะเลี้ยงเป็นเวลานาน ในการทดสอบการจับกับเซลล์แบบใช้เซลล์เป็นฐาน IgG ที่ได้จาก B-LCL-HROC59 แสดงการจับกับเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด allogeneic ที่ทดสอบได้เพียงเล็กน้อย เมื่อเปรียบเทียบกับ IgG ที่ได้จาก TiBc ชนิดอื่นซึ่งแสดงการตอบสนองต่อเซลล์เนื้องอกที่แข็งแรงกว่า ไม่พบหลักฐานของการเจริญเติบโตของเซลล์ B อย่างฉับพลันในสภาวะที่ไม่มีเชื้อ EBV ภายนอกระหว่างการตั้งวัฒนธรรม ซึ่งบ่งชี้ว่าการเกิดความเป็นอมตะเกิดขึ้นในหลอดทดลองมากกว่าที่จะเป็นการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากเชื้อ EBV ที่แฝงตัวอยู่ในร่างกาย ในฐานะเซลล์ไลน์บี-เซลล์ที่แทรกซึมในเนื้องอกและสัมผัสกับแอนติเจนชนิดโมโนโคลนอล B-LCL-HROC59 ให้แบบจำลองที่กำหนดไว้สำหรับการศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบฮิวโมรัลภายในสภาพแวดล้อมจุลภาคของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก และสำหรับการตรวจสอบความจำเพาะและคุณสมบัติการทำงานของแอนติบอดีที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.