B-LCL-HROC59

B-LCL-HROC59 je človeška B-limfoblastna celična linija, nesmrtonosna zaradi virusa Epstein-Barr (EBV), ki je bila ustvarjena iz tumorja infiltriranih B-celic (TiBc), izoliranih iz primarnega kolorektalnega karcinoma, imenovanega HROC59. Starševski tumor je bil odstranjen iz odraslega moškega pacienta z desnostranskim sporadičnim kolorektalnim karcinomom in napredno boleznijo. Sveže tumorsko tkivo je bilo mehansko razgrajeno, da se je pridobilo suspenzije enoceličnih celic, B-celice pa so bile selektivno nesmrtožne in vitro z uporabo supernatanta, ki vsebuje EBV, pridobljenega iz celične linije marmoset B95/8 v prisotnosti ciklosporina A za zaviranje širjenja T- in NK-celic. Dolgotrajna kultura je privedla do stabilne rasti populacije monoklonalnih B-celic, kot je pokazala analiza preureditve imunoglobulinskega gena.

B-LCL-HROC59 izloča imunoglobulin G (IgG) kot svoj ekskluzivni izotip, s stabilno proizvodnjo med podaljšano kultiviranjem. V celičnih vezavnih testih je IgG, pridobljen iz B-LCL-HROC59, pokazal le minimalno vezavo na testirane alogene celične linije kolorektalnega karcinoma v primerjavi z drugimi IgG, pridobljenimi iz TiBc, ki so pokazali močnejšo reaktivnost tumorjev. Med vzpostavitvijo kulture ni bilo opaziti nobenih znakov spontanega razraščanja B-celic v odsotnosti eksogenega EBV, kar kaže, da je imortalizacija potekala in vitro in ne odraža latentne transformacije, povzročene z EBV in vivo. Kot monoklonska, antigenu izpostavljena linija B-celic, ki infiltrira tumor, B-LCL-HROC59 zagotavlja definiran model za preučevanje humoralnih imunskih odzivov v mikrookolju kolorektalnega raka in za preučevanje specifičnosti in funkcionalnih lastnosti protiteles, povezanih s tumorjem.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo