Przejdź do treści
Komórki CADO-ES1
Chusteczka
Kość
Choroba
Mięsak Ewinga
Synonimy
CADO-ES-1, CADO ES1, CADOES1, CADO-ES, Cado-ES, ESCADO1, Center for Adult Diseases Osaka-Ewing Sarcoma 1

Dokumenty

Komórki CADO-ES1

Cell line · Numer produktu 300127

Linia komórkowa CADO-ES1 została wyhodowana z złośliwego wysięku opłucnowego pobranego od 19-letniej pacjentki, u której zdiagnozowano mięsaka Ewinga, pierwotnie...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa CADO-ES1 została utworzona ze złośliwego wysięku opłucnowego pobranego od 19-letniej pacjentki, u której zdiagnozowano mięsaka Ewinga, zlokalizowanego głównie w prawym pośladku z licznymi przerzutami do płuc. Ta linia komórkowa stanowi cenne narzędzie do badań nad biologią mięsaków, w szczególności do badania procesów przerzutowych związanych z mięsakiem Ewinga. Jako choroba dotykająca głównie dzieci i młodych dorosłych, mięsak Ewinga charakteryzuje się małymi okrągłymi komórkami, które są wysoce złośliwe, często wykazują agresywne zachowanie i złe rokowanie, szczególnie w przypadku przerzutów.

Wyjątkowe komórki CADO-ES1 wykazują kilka krytycznych cech cennych dla dogłębnych badań nad rakiem. Są heterotransplantowalne, co oznacza, że mogą być przeszczepiane innym gatunkom (np. myszom), co ma kluczowe znaczenie dla badań in vivo. Zdolność ta czyni je solidnym modelem do badania wzrostu guza i przerzutów w kontrolowanym, ale biologicznie istotnym systemie. Dodatkowo, komórki te wykazały zdolność do wzrostu niezależnie od zakotwiczenia, co jest cechą typową dla wielu komórek nowotworowych, która pozwala im rozwijać się bez przylegania do macierzy zewnątrzkomórkowej. Co więcej, komórki CADO-ES1 mogą różnicować się neuronalnie w odpowiedzi na cykliczny AMP (cAMP), zapewniając unikalną perspektywę zachowań komórkowych, na które wpływają szlaki sygnałowe w progresji i różnicowaniu nowotworów.

Ta kombinacja cech sprawia, że CADO-ES1 jest ważnym modelem nie tylko dla zrozumienia patologii mięsaka Ewinga, ale także dla rozwoju i testowania ukierunkowanych terapii, które mogą hamować wzrost i rozprzestrzenianie się podobnych nowotworów. Badania wykorzystujące tę linię komórkową mogą przyczynić się do głębszego zrozumienia zachowania komórek nowotworowych, mechanizmów przerzutowania i potencjalnych celów terapeutycznych w mięsakach.

Chusteczka
Kość
Choroba
Mięsak Ewinga
Synonimy
  • CADO-ES-1
  • CADO ES1
  • CADOES1
  • CADO-ES
  • Cado-ES
  • ESCADO1
  • Center for Adult Diseases Osaka-Ewing Sarcoma 1

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Małe okrągłe komórki

04Identyfikatory

Źródło
CADO-ES1 (numer katalogowy Cytion 300127)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1103

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
CD99 (Eun Jung Lee, 2003)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS inaktywowanym termicznie
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
Co 3 do 4 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
19 lat
Pochodzenie etniczne
Japoński