Siirry sisältöön
CADO-ES1-solut
Kudos
Luu
Sairaus
Ewingin sarkooma
Synonyymit
CADO-ES-1, CADO ES1, CADOES1, CADO-ES, Cado-ES, ESCADO1, Center for Adult Diseases Osaka-Ewing Sarcoma 1

Asiakirjat

CADO-ES1-solut

Cell line · Tuotenumero 300127

CADO-ES1-solulinja perustettiin pahanlaatuisesta keuhkopussinesteestä, joka otettiin 19-vuotiaalta naispotilaalta, jolla oli diagnosoitu Ewingin sarkooma, pääasiassa...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CADO-ES1-solulinja perustettiin pahanlaatuisesta pleuraeritteestä, joka otettiin 19-vuotiaalta naispotilaalta, jolla todettiin Ewingin sarkooma, joka sijaitsi pääasiassa oikeassa pakarassa ja jolla oli useita keuhkometastaaseja. Tämä solulinja on arvokas väline sarkooman biologian tutkimukseen, erityisesti Ewingin sarkoomaan liittyvien metastaattisten prosessien tutkimiseen. Ewingin sarkoomalle, joka on pääasiassa lapsia ja nuoria aikuisia vaivaava sairaus, ovat ominaisia pienet pyöreät solut, jotka ovat erittäin pahanlaatuisia, usein aggressiivisia ja joiden ennuste on huono, erityisesti silloin kun ne saavat etäpesäkkeitä.

CADO-ES1-soluilla on ainutlaatuisella tavalla useita kriittisiä ominaisuuksia, jotka ovat arvokkaita syvällisen syöpätutkimuksen kannalta. Ne ovat heterotransplantaatiokykyisiä, mikä tarkoittaa, että ne voidaan siirtää eri lajeihin (esim. hiiriin), mikä on elintärkeää in vivo -tutkimuksissa. Tämä kyky tekee niistä vankan mallin kasvainten kasvun ja etäpesäkkeiden tutkimiseen kontrolloidussa, mutta biologisesti merkityksellisessä järjestelmässä. Lisäksi nämä solut ovat osoittaneet kykenevänsä kasvamaan ankkuroitumisesta riippumatta, mikä on monille syöpäsoluille tyypillinen ominaisuus, jonka ansiosta ne voivat menestyä ilman kiinnittymistä solunulkoiseen matriisiin. Lisäksi CADO-ES1-solut voivat erilaistua hermostollisesti syklisen AMP:n (cAMP) vaikutuksesta, mikä tarjoaa ainutlaatuisen näkökulman solujen käyttäytymiseen, johon signaalireitit vaikuttavat syövän etenemisessä ja erilaistumisessa.

Tämä ominaisuuksien yhdistelmä tekee CADO-ES1:stä merkittävän mallin paitsi Ewingin sarkooman patologian ymmärtämiselle myös sellaisten kohdennettujen hoitojen kehittämiselle ja testaamiselle, jotka voisivat estää samankaltaisten syöpien kasvua ja leviämistä. Tätä solulinjaa hyödyntävä tutkimus voi auttaa ymmärtämään syvällisemmin syöpäsolujen käyttäytymistä, etäpesäkemekanismeja ja mahdollisia terapeuttisia kohteita sarkoomissa.

Kudos
Luu
Sairaus
Ewingin sarkooma
Synonyymit
  • CADO-ES-1
  • CADO ES1
  • CADOES1
  • CADO-ES
  • Cado-ES
  • ESCADO1
  • Center for Adult Diseases Osaka-Ewing Sarcoma 1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pienet pyöreät solut

04Tunnisteet

Lähdeviite
CADO-ES1 (Cytionin luettelonumero 300127)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1103

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
CD99 (Eun Jung Lee, 2003)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
3-4 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
19 vuotta
Etnisyys
Japanilainen