Mine otse sisu juurde
CADO-ES1 rakud
Kude
Bone
Haigus
Ewingi sarkoom
Sünonüümid
CADO-ES-1, CADO ES1, CADOES1, CADO-ES, Cado-ES, ESCADO1, Center for Adult Diseases Osaka-Ewing Sarcoma 1

Dokumendid

CADO-ES1 rakud

Cell line · Toote number 300127

Rakuliin CADO-ES1 loodi 19-aastaselt naispatsiendilt võetud pahaloomulisest pleuraefusioonist, kellel oli diagnoositud Ewingi sarkoom, peamiselt...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CADO-ES1 rakuliin loodi pahaloomulisest pleuraefusioonist, mis saadi 19-aastaselt naispatsiendilt, kellel diagnoositi Ewingi sarkoom, mis paiknes peamiselt paremas tuharas ja millel oli mitmeid kopsumetastaase. See rakuliin on väärtuslik vahend sarkoomi bioloogia uurimiseks, eelkõige Ewingi sarkoomiga seotud metastaatiliste protsesside uurimiseks. Ewingi sarkoomi kui peamiselt lapsi ja noori täiskasvanuid mõjutavat haigust iseloomustavad väikesed ümmargused rakud, mis on väga pahaloomulised, sageli agressiivse käitumisega ja halva prognoosiga, eriti kui need annavad metastaate.

CADO-ES1 rakkudel on mitmeid kriitilisi omadusi, mis on väärtuslikud vähktõve süvauuringute jaoks. Nad on heterotransplanteeritavad, mis tähendab, et neid saab siirdada teistesse liikidesse (nt hiirtesse), mis on oluline in vivo uuringute jaoks. See võime muudab nad usaldusväärseks mudeliks, mille abil saab uurida kasvaja kasvu ja metastaaside teket kontrollitud, kuid bioloogiliselt asjakohases süsteemis. Lisaks on need rakud näidanud, et nad suudavad kasvada ankurdumisest sõltumatult, mis on paljudele vähirakkudele iseloomulik omadus, mis võimaldab neil areneda ilma rakuvälise maatriksi külge kinnitumata. Lisaks sellele suudavad CADO-ES1 rakud diferentseeruda neuronaalselt vastuseks tsüklilisele AMP-le (cAMP), mis annab ainulaadse vaatenurga rakkude käitumisele, mida mõjutavad signaaliteedid vähi progresseerumisel ja diferentseerumisel.

Selline omaduste kombinatsioon muudab CADO-ES1 oluliseks mudeliks mitte ainult Ewingi sarkoomi patoloogia mõistmiseks, vaid ka selliste sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamiseks ja katsetamiseks, mis võivad pärssida sarnaste vähivormide kasvu ja levikut. Seda rakuliini kasutavad uuringud võivad aidata kaasa vähirakkude käitumise, metastaatiliste mehhanismide ja sarkoomide võimalike ravieesmärkide sügavamale mõistmisele.

Kude
Bone
Haigus
Ewingi sarkoom
Sünonüümid
  • CADO-ES-1
  • CADO ES1
  • CADOES1
  • CADO-ES
  • Cado-ES
  • ESCADO1
  • Center for Adult Diseases Osaka-Ewing Sarcoma 1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Väikesed ümmargused rakud

04Tunnused

Viide
CADO-ES1 (Cytioni katalooginumber 300127)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1103

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
CD99 (Eun Jung Lee, 2003)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 4 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
19 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani