Przejdź do treści
CHO-IL2RA
Chusteczka
Jajnik
Choroba
Komórki jajnika chomika chińskiego, nienowotworowe; zmodyfikowane genetycznie w celu ekspresji IL2RA (CD25) na powierzchni komórkowej

Dokumenty

CHO-IL2RA

Cell line · Numer produktu 305980

Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich i organizacji non-profit. W przypadku podmiotów komercyjnych ceny...

€1,900.00bez podatku i kosztów wysyłki
Wykonane na zamówienie
1

01Informacje ogólne

Opis

Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich lub organizacji non-profit. Dla podmiotów komercyjnych cena wynosi około 6 250 euro.
Jeśli reprezentujesz podmiot komercyjny lub nie masz pewności, która kategoria ma zastosowanie, prosimy o kontakt.


Komórki CHO-IL2RA to rekombinowane komórki jajnika chomika chińskiego (CHO), zmodyfikowane genetycznie w celu stabilnej ekspresji ludzkiego receptora alfa interleukiny-2 (IL-2Rα; CD25/IL2RA), podjednostki receptora cytokinowego o wysokim powinowactwie, biorącej udział w regulacji aktywacji komórek T i homeostazy immunologicznej. CD25 wraz z IL-2Rβ (CD122) i wspólnym łańcuchem gamma (CD132) tworzy część heterotrimerycznego kompleksu receptora IL-2, umożliwiając wiązanie interleukiny-2 o wysokim powinowactwie oraz aktywację dalszych szlaków sygnałowych JAK/STAT. Z fizjologicznego punktu widzenia CD25 jest silnie wyrażany na aktywowanych limfocytach T i regulacyjnych komórkach T (Treg), a nieprawidłową ekspresję odnotowano również w przypadku kilku nowotworów hematologicznych i zaburzeń zapalnych.

Komórki CHO-IL2RA są szeroko stosowane w immunologii i procesach rozwoju terapii do charakteryzowania przeciwciał monoklonalnych anty-CD25, terapii opartych na cytokinach, przeciwciał bispecyficznych oraz strategii celowania w zmodyfikowane komórki odpornościowe. Stabilny system ekspresji rekombinowanej umożliwia ilościową ocenę wiązania liganda, zajętości receptora, powinowactwa przeciwciała oraz internalizacji receptora. Komórki te są również przydatne w opracowywaniu testów cytometrii przepływowej, badaniach siły działania, testach wiązania opartych na komórkach oraz zastosowaniach przesiewowych o wysokiej wydajności związanych z modulacją szlaku IL-2. Ponadto modele CHO-IL2RA mogą wspierać badania dotyczące selektywnego celowania w aktywowane komórki T lub mechanizmów związanych z regulacyjnymi komórkami T w autoimmunizacji, transplantacji i immunoterapii nowotworów.

Chusteczka
Jajnik
Choroba
Komórki jajnika chomika chińskiego, nienowotworowe; zmodyfikowane genetycznie w celu ekspresji IL2RA (CD25) na powierzchni komórkowej
Zastosowania
Badania przesiewowe w kierunku przeciwciał; opracowywanie terapii ukierunkowanych na IL2RA; badania nad biologią komórek T; badania nad chorobami autoimmunologicznymi; cytometria przepływowa

02Klasyfikacja

Organizm
chomik chiński
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This CHO cell line contains an IL2RA expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórki nabłonkowe
Czas podwojenia
ok. 14–16 godzin

04Identyfikatory

Źródło
CHO-IL2RA (nr katalogowy Cytion 305980)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W8

05Ekspresja i podatność

Antygeny powierzchniowe
IL2RA (CD25)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana

Dla hodowli adherentnych: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)

Dla hodowli zawiesinowych: CHO Growth Medium A (od InSCREENeX; numer katalogowy InSCREENeX INS-ME-1039)

Suplementy
Dla hodowli przylegających: Uzupełnić pożywkę 5% FBS. Dodać Geneticin (G418-Sulfat), aby osiągnąć końcowe stężenie 0,5 mg/ml.
Odczynnik dysocjacyjny
Dla kultur przylegających: Trypsyna-EDTA
Hodowla komórek w subkulturze
W przypadku rutynowej hodowli komórek przylegających: Odessać starą pożywkę z przylegających komórek i przemyć je PBS w celu usunięcia pozostałości pożywki. Po odessaniu PBS, dodać odpowiednią objętość roztworu Trypsyna/EDTA w zależności od rozmiaru naczynia hodowlanego (np. 1 ml dla kolby T25, 3 ml dla kolby T75) i inkubować w temperaturze pokojowej lub 37°C przez 5-10 minut lub do momentu odłączenia się komórek. Monitoruj oderwanie pod mikroskopem i delikatnie postukaj w naczynie, jeśli to konieczne, aby uwolnić komórki. Po odłączeniu dodać pełną pożywkę w celu inaktywacji trypsyny/EDTA, delikatnie ponownie zawiesić komórki i przenieść porcję zawiesiny komórek do nowego naczynia hodowlanego zawierającego świeżą pożywkę. Umieść naczynie w inkubatorze ustawionym na 37°C z 5%CO2 i zmieniaj pożywkę co 2-3 dni.
Współczynnik podziału
od 1 do 5
Gęstość wysiewu
2 do 5 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia

Po rozmrożeniu rozdzielić komórki w stosunku 1:2 do 1:3 w kolbach T25 i pozwolić komórkom na regenerację po procesie zamrażania i przyleganie (w przypadku hodowli adherentnych) przez co najmniej 24 godziny.

Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Dorosły