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CHO-IL2RA
Tissue
Ovario
Disease
Ovario de hámster chino, no neoplásico; modificado genéticamente para la expresión de IL2RA (CD25) en la superficie

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CHO-IL2RA

Cell line · Product number 305980

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

Aviso legal: Los precios que se muestran para las líneas celulares son exclusivamente para clientes académicos o sin fines de lucro. Para entidades comerciales, el precio es de aproximadamente 6 250 €.
Si representa a una entidad comercial o no está seguro de a qué categoría pertenece, por favor contáctenos.


Las células CHO-IL2RA son células recombinantes de ovario de hámster chino (CHO) modificadas genéticamente para expresar de manera estable el receptor alfa de la interleucina-2 humana (IL-2Rα; CD25/IL2RA), una subunidad del receptor de citocinas de alta afinidad que participa en la regulación de la activación de las células T y la homeostasis inmunológica. El CD25 forma parte del complejo heterotrimérico del receptor de IL-2 junto con el IL-2Rβ (CD122) y la cadena gamma común (CD132), lo que permite la unión de alta afinidad de la interleucina-2 y la activación de las vías de señalización JAK/STAT posteriores. Fisiológicamente, el CD25 se expresa en altos niveles en los linfocitos T activados y en las células T reguladoras (Tregs), y también se ha reportado una expresión anómala en varias neoplasias hematológicas y trastornos inflamatorios.

Las células CHO-IL2RA se utilizan ampliamente en inmunología y en los flujos de trabajo de desarrollo terapéutico para la caracterización de anticuerpos monoclonales anti-CD25, terapias basadas en citocinas, anticuerpos biespecíficos y estrategias de orientación de células inmunitarias modificadas genéticamente. El sistema de expresión recombinante estable permite la evaluación cuantitativa de la unión del ligando, la ocupación del receptor, la afinidad del anticuerpo y la internalización del receptor. Estas células también son valiosas para el desarrollo de ensayos de citometría de flujo, pruebas de potencia, ensayos de unión basados en células y aplicaciones de cribado de alto rendimiento que involucran la modulación de la vía de la IL-2. Además, los modelos CHO-IL2RA pueden servir de base para estudios que examinen la orientación selectiva hacia las células T activadas o los mecanismos asociados a las células T reguladoras en la autoinmunidad, los trasplantes y la inmunoterapia contra el cáncer.

Tissue
Ovario
Disease
Ovario de hámster chino, no neoplásico; modificado genéticamente para la expresión de IL2RA (CD25) en la superficie
Applications
Cribado de anticuerpos; desarrollo de terapias dirigidas contra el IL2RA; investigación en biología de las células T; investigación en enfermedades autoinmunes; citometría de flujo

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This CHO cell line contains an IL2RA expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células epiteliales
Doubling time
aprox. 14-16 horas

04Identifiers

Citation
CHO-IL2RA (número de catálogo de Cytion 305980)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W8

05Expression and susceptibility

Surface antigens
IL2RA (CD25)

06Handling and culture

Culture medium

Para cultivos adherentes: DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)

Para cultivos en suspensión: Medio de crecimiento CHO A (de InSCREENeX; número de catálogo de InSCREENeX INS-ME-1039)

Supplements
Para cultivos adherentes: Agregue al medio un 5 % de FBS. Agregue Geneticin (G418-Sulfat) hasta alcanzar una concentración final de 0,5 mg/mL.
Dissociation reagent
Para cultivos adherentes: tripsina-EDTA
Subculturing
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspire el medio de cultivo usado de las células adherentes y lávelas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, agregue el volumen adecuado de solución de tripsina/EDTA según el tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un frasco T25, 3 ml para un frasco T75) e incuba a temperatura ambiente o a 37 °C durante 5 a 10 minutos, o hasta que las células se desprendan. Observe el desprendimiento bajo el microscopio y, si es necesario, golpee suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, agregue medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspenda suavemente las células y transfiera una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Coloque el recipiente en una incubadora ajustada a 37 °C con 5 % de CO₂, y cambie el medio cada 2 a 3 días.
Split ratio
Del 1 al 5
Seeding density
De 2 a 5 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Post-thaw recovery

Después de descongelar, divida las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en frascos T25 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (en el caso de cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
Adulto