- Væv
- Æggestokkene
- Sygdom
- Æggestokceller fra kinesisk hamster, ikke-neoplastiske; genetisk modificeret til overfladeekspression af IL2RA (CD25)
Dokumenter
CHO-IL2RA
Cell line · Varenummer 305980
Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder gælder pr...
Tilpasning / Anbefalinger
- CHO-IL2RACell line€1,900.00
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser for cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder er prisen ca. 6.250 €.
Hvis du repræsenterer en kommerciel virksomhed eller er i tvivl om, hvilken kategori der gælder, bedes du kontakte os.
CHO-IL2RA-celler er rekombinante kinesiske hamster-æggestokceller (CHO), der er konstrueret til stabilt at udtrykke human interleukin-2-receptor alfa (IL-2Rα; CD25/IL2RA), en cytokinreceptor-underenhed med høj affinitet, der er involveret i regulering af T-celleaktivering og immunhomeostase. CD25 udgør en del af det heterotrimere IL-2-receptorkompleks sammen med IL-2Rβ (CD122) og den fælles gammakæde (CD132), hvilket muliggør højaffinitetsbinding af interleukin-2 og aktivering af nedstrøms JAK/STAT-signalveje. Fysiologisk udtrykkes CD25 i høj grad på aktiverede T-lymfocytter og regulatoriske T-celler (Tregs), og der er også rapporteret om afvigende ekspression i flere hæmatologiske maligniteter og inflammatoriske lidelser.
CHO-IL2RA-celler anvendes i vid udstrækning i immunologi og terapeutisk udvikling til karakterisering af monoklonale anti-CD25-antistoffer, cytokinbaserede lægemidler, bispecifikke antistoffer og strategier for målretning af manipulerede immunceller. Det stabile rekombinante ekspressionssystem muliggør kvantitativ vurdering af ligandbinding, receptorbelægning, antistofaffinitet og receptorinternalisation. Disse celler er også værdifulde til udvikling af flowcytometri-assays, styrketest, cellebaserede bindingsassays og højkapacitets-screening-applikationer, der involverer modulering af IL-2-signalvejen. Derudover kan CHO-IL2RA-modeller understøtte studier, der undersøger selektiv målretning af aktiverede T-celler eller regulatoriske T-celle-associerede mekanismer inden for autoimmunitet, transplantation og kræftimmunterapi.
- Væv
- Æggestokkene
- Sygdom
- Æggestokceller fra kinesisk hamster, ikke-neoplastiske; genetisk modificeret til overfladeekspression af IL2RA (CD25)
- Anvendelser
- Antistofscreening; udvikling af IL2RA-målrettet terapi; forskning i T-cellebiologi; forskning i autoimmune sygdomme; flowcytometri
02Klassificering
- Organisme
- Kinesisk hamster
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Adhæsion og suspension
- GMO-status
- GMO-S1
- Oplysninger om GMO-status
- GMO-S1: This CHO cell line contains an IL2RA expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitheliale celler
- Fordoblingstid
- ca. 14–16 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- CHO-IL2RA (Cytion-katalognummer 305980)
- NCBI-skattenummer
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8W8
05Udtryk og modtagelighed
- Overfladeantigener
- IL2RA (CD25)
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
Til klæbende kulturer: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Til suspensionskulturer: CHO Growth Medium A (fra InSCREENeX; InSCREENeX katalognummer INS-ME-1039)
- Kosttilskud
- Til klæbende kulturer: Suppler mediet med 5 % FBS. Tilsæt Geneticin (G418-Sulfat) for at opnå en endelig koncentration på 0,5 mg/mL.
- Dissociationsreagens
- Til klæbende kulturer: Trypsin-EDTA
- Oddyrkning
- Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C i 5-10 minutter, eller indtil cellerne løsner sig. Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
- Opdelingsforhold
- 1 til 5
- Såtæthed
- 2 til 5 x 104 celler/cm2
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
Efter optøning deles cellerne i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellerne får lov til at komme sig over fryseprocessen og klæbe (for klæbende kulturer) i mindst 24 timer.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- Voksen
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Ansvarsfraskrivelse
- Vores celler leveres udelukkende til in vitro-laboratorieforskningsformål og er ikke beregnet til klinisk eller diagnostisk brug, og de må heller ikke administreres til mennesker eller bruges til veterinære formål. Brugere skal overholde alle gældende retningslinjer og regler for håndtering og brug af disse celler i en forskningsmæssig sammenhæng.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der gælder aftaler med tredjeparter
- Ja
.jpg)