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CHO-IL2RA
Tissue
Ovaire
Disease
Ovaires de hamster chinois, non néoplasiques; modifiés génétiquement pour l'expression de l'IL2RA (CD25) en surface

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CHO-IL2RA

Cell line · Product number 305980

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

Avertissement : Les prix indiqués pour les lignées cellulaires s’adressent exclusivement aux clients du milieu universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d’environ 6 250 €.
Si vous représentez une entité commerciale ou si vous ne savez pas à quelle catégorie vous appartenez, veuillez nous contacter.


Les cellules CHO-IL2RA sont des cellules d’ovaire de hamster chinois (CHO) recombinantes, modifiées pour exprimer de manière stable le récepteur alpha de l’interleukine-2 humaine (IL-2Rα; CD25/IL2RA), une sous-unité de récepteur de cytokine à haute affinité impliquée dans la régulation de l’activation des cellules T et de l’homéostasie immunitaire. Le CD25 fait partie du complexe hétérotrimérique du récepteur de l’IL-2, aux côtés de l’IL-2Rβ (CD122) et de la chaîne gamma commune (CD132), ce qui permet une liaison à haute affinité de l’interleukine-2 et l’activation des voies de signalisation JAK/STAT en aval. Sur le plan physiologique, le CD25 est fortement exprimé sur les lymphocytes T activés et les cellules T régulatrices (Treg), et une expression anormale a également été rapportée dans plusieurs hémopathies malignes et troubles inflammatoires.

Les cellules CHO-IL2RA sont largement utilisées en immunologie et dans les processus de développement thérapeutique pour la caractérisation des anticorps monoclonaux anti-CD25, des thérapies à base de cytokines, des anticorps bispécifiques et des stratégies de ciblage des cellules immunitaires modifiées. Ce système d’expression recombinant stable permet l’évaluation quantitative de la liaison du ligand, de l’occupation du récepteur, de l’affinité de l’anticorps et de l’internalisation du récepteur. Ces cellules sont également précieuses pour le développement de tests par cytométrie en flux, les essais de puissance, les tests de liaison basés sur les cellules et les applications de criblage à haut débit impliquant la modulation de la voie de l’IL-2. De plus, les modèles CHO-IL2RA peuvent servir de support à des études portant sur le ciblage sélectif des cellules T activées ou sur les mécanismes associés aux cellules T régulatrices dans les domaines de l’auto-immunité, de la transplantation et de l’immunothérapie contre le cancer.

Tissue
Ovaire
Disease
Ovaires de hamster chinois, non néoplasiques; modifiés génétiquement pour l'expression de l'IL2RA (CD25) en surface
Applications
Dépistage d’anticorps; développement de traitements ciblant l’IL2RA; recherche en biologie des cellules T; recherche sur les maladies auto-immunes; cytométrie en flux

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This CHO cell line contains an IL2RA expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Cell type
Cellules épithéliales
Doubling time
environ 14 à 16 heures

04Identifiers

Citation
CHO-IL2RA (numéro de catalogue Cytion 305980)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W8

05Expression and susceptibility

Surface antigens
IL2RA (CD25)

06Handling and culture

Culture medium

Pour les cultures adhérentes : DMEM : Ham’s F12 (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)

Pour les cultures en suspension : milieu de croissance CHO A (de InSCREENeX; numéro de catalogue InSCREENeX INS-ME-1039)

Supplements
Pour les cultures adhérentes : compléter le milieu avec 5 % de FBS. Ajouter du Geneticin (G418-Sulfat) afin d’obtenir une concentration finale de 0,5 mg/mL.
Dissociation reagent
Pour les cultures adhérentes : trypsine-EDTA
Subculturing
Pour une culture cellulaire adhérente de routine : Aspirez l’ancien milieu de culture des cellules adhérentes, puis lavez-les avec du PBS afin d’éliminer tout résidu de milieu. Après avoir aspiré le PBS, ajoutez le volume approprié de solution de trypsine/EDTA en fonction de la taille du récipient de culture (p. ex., 1 ml pour un flacon T25, 3 ml pour un flacon T75) et incubez à température ambiante ou à 37 °C pendant 5 à 10 minutes, ou jusqu’à ce que les cellules se détachent. Surveillez le détachement au microscope et tapotez doucement le récipient si nécessaire pour libérer les cellules. Une fois les cellules détachées, ajoutez du milieu complet pour inactiver la trypsine/EDTA, remettez délicatement les cellules en suspension, puis transférez une aliquote de la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture contenant du milieu frais. Placez le récipient dans un incubateur réglé à 37 °C avec 5 % de CO₂, et changez le milieu tous les 2 à 3 jours.
Split ratio
1 à 5
Seeding density
de 2 à 5 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery

Après la décongélation, divisez les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laissez-les se remettre du processus de congélation et adhérer (pour les cultures adhérentes) pendant au moins 24 heures.

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
Adulte