Ga naar de inhoud
CHO-IL2RA
Weefsel
Eierstok
Ziekte
Eierstokcellen van de Chinese hamster, niet-neoplastisch; genetisch gemodificeerd voor oppervlakte-expressie van IL2RA (CD25)

Documenten

CHO-IL2RA

Cell line · Productnummer 305980

Disclaimer: De weergegeven prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische klanten en klanten zonder winstoogmerk. Voor commerciële entiteiten gelden de pr...

€1,900.00excl. btw en verzendkosten
Op bestelling gemaakt
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Disclaimer: De getoonde prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische/non-profitklanten. Voor commerciële partijen bedraagt de prijs ongeveer € 6.250.
Als u een commerciële partij vertegenwoordigt of niet zeker weet tot welke categorie u behoort, neem dan contact met ons op.


CHO-IL2RA-cellen zijn recombinante Chinese hamster-ovariumcellen (CHO-cellen) die zijn gemanipuleerd om op stabiele wijze de menselijke interleukine-2-receptor alfa (IL-2Rα; CD25/IL2RA) tot expressie te brengen, een cytokine-receptorsubeenheid met hoge affiniteit die betrokken is bij de regulering van T-celactivering en immuunhomeostase. CD25 maakt deel uit van het heterotrimere IL-2-receptorcomplex, samen met IL-2Rβ (CD122) en de gemeenschappelijke gamma-keten (CD132), waardoor binding met hoge affiniteit van interleukine-2 en activering van stroomafwaartse JAK/STAT-signaalroutes mogelijk wordt. Fysiologisch wordt CD25 in hoge mate tot expressie gebracht op geactiveerde T-lymfocyten en regulerende T-cellen (Tregs), en er is ook afwijkende expressie gemeld bij verschillende hematologische maligniteiten en ontstekingsaandoeningen.

CHO-IL2RA-cellen worden op grote schaal gebruikt in immunologie en bij de ontwikkeling van therapieën voor de karakterisering van monoklonale anti-CD25-antilichamen, op cytokines gebaseerde therapieën, bispecifieke antilichamen en strategieën voor het richten op gemanipuleerde immuuncellen. Het stabiele recombinante expressiesysteem maakt kwantitatieve beoordeling mogelijk van ligandbinding, receptorbezetting, antilichaamaffiniteit en receptorinternalisatie. Deze cellen zijn ook waardevol voor de ontwikkeling van flowcytometrie-assays, potentietesten, celgebaseerde bindingsassays en high-throughput screeningtoepassingen waarbij modulatie van de IL-2-route betrokken is. Bovendien kunnen CHO-IL2RA-modellen ondersteuning bieden bij studies naar selectieve targeting van geactiveerde T-cellen of regulerende T-cel-geassocieerde mechanismen bij auto-immuniteit, transplantatie en immuuntherapie bij kanker.

Weefsel
Eierstok
Ziekte
Eierstokcellen van de Chinese hamster, niet-neoplastisch; genetisch gemodificeerd voor oppervlakte-expressie van IL2RA (CD25)
Toepassingen
Antilichaamscreening; ontwikkeling van op IL2RA gerichte therapieën; onderzoek naar T-celbiologie; onderzoek naar auto-immuunziekten; flowcytometrie

02Classificatie

Organisme
Chinese hamster
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Adhesie en suspensie
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This CHO cell line contains an IL2RA expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcellen
Verdubbelingstijd
ongeveer 14-16 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
CHO-IL2RA (Cytion-catalogusnummer 305980)
NCBI-belastingnummer
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W8

05Expressie en vatbaarheid

Oppervlakte-antigenen
IL2RA (CD25)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium

Voor adherente culturen: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)

Voor suspensieculturen: CHO Growth Medium A (van InSCREENeX; InSCREENeX catalogusnummer INS-ME-1039)

Supplementen
Voor adherente culturen: Vul het medium aan met 5% FBS. Geneticine (G418-Sulfat) toevoegen tot een eindconcentratie van 0,5 mg/ml.
Dissociatiereagens
Voor adherente culturen: Trypsine-EDTA
Heruitplanten
Voor routinematige adherente celkweek: Zuig het oude kweekmedium van de adherente cellen af en was ze met PBS om eventueel achtergebleven medium te verwijderen. Voeg na het opzuigen van de PBS het juiste volume trypsine/EDTA-oplossing toe op basis van de grootte van het kweekvat (bijv. 1 ml voor een T25-kolf, 3 ml voor een T75-kolf) en incubeer bij kamertemperatuur of 37 °C gedurende 5-10 minuten, of totdat de cellen loskomen. Controleer de onthechting onder een microscoop en tik zo nodig voorzichtig op het vat om de cellen los te maken. Voeg na het losmaken volledig medium toe om de trypsine/EDTA te inactiveren, resuspendeer de cellen voorzichtig en breng een aliquot van de celsuspensie over in een nieuw kweekvat met vers medium. Plaats het kweekvat in een incubator die is ingesteld op 37°C met 5%CO2 en ververs het medium elke 2-3 dagen.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
2 tot 5 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing

Splits de cellen na het ontdooien in een verhouding van 1:2 tot 1:3 in T25-flesjes en laat de cellen minstens 24 uur bijkomen van het vriesproces en zich hechten (voor adherente culturen).

Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Volwassen