Přejít na obsah
CHO-IL2RA
Tkáň
Ovarium
Nemoc
Vaječníky čínského křečka, nenádorové; geneticky modifikované pro povrchovou expresi IL2RA (CD25)

Dokumenty

CHO-IL2RA

Cell line · Číslo výrobku 305980

Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty platí ceny...

€1,900.00bez DPH a poštovného
Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty činí cena přibližně 6 250 EUR.
Pokud zastupujete komerční subjekt nebo si nejste jisti, do které kategorie spadáte, prosím nás kontaktujte.


CHO-IL2RA buňky jsou rekombinantní buňky vaječníků čínského křečka (CHO), které byly geneticky upraveny tak, aby stabilně exprimovaly lidský receptor interleukinu-2 alfa (IL-2Rα; CD25/IL2RA), podjednotku cytokinového receptoru s vysokou afinitou, která se podílí na regulaci aktivace T-buněk a imunitní homeostázy. CD25 tvoří spolu s IL-2Rβ (CD122) a společným gama řetězcem (CD132) součást heterotrimerního komplexu receptoru IL-2, což umožňuje vazbu interleukinu-2 s vysokou afinitou a aktivaci následných signálních drah JAK/STAT. Fyziologicky je CD25 vysoce exprimován na aktivovaných T lymfocytech a regulačních T buňkách (Tregs) a abnormální exprese byla také zaznamenána u několika hematologických malignit a zánětlivých onemocnění.

Buňky CHO-IL2RA jsou široce využívány v imunologii a při vývoji léčiv k charakterizaci monoklonálních protilátek proti CD25, léčiv na bázi cytokinů, bispecifických protilátek a strategií cílení na modifikované imunitní buňky. Stabilní rekombinantní expresní systém umožňuje kvantitativní hodnocení vazby ligandu, obsazení receptoru, afinity protilátky a internalizace receptoru. Tyto buňky jsou také cenné pro vývoj testů průtokové cytometrie, testování účinnosti, buněčné vazebné testy a aplikace vysokokapacitního screeningu zahrnující modulaci signální dráhy IL-2. Kromě toho mohou modely CHO-IL2RA podporovat studie zkoumající selektivní cílení na aktivované T buňky nebo mechanismy spojené s regulačními T buňkami v autoimunitě, transplantaci a imunoterapii rakoviny.

Tkáň
Ovarium
Nemoc
Vaječníky čínského křečka, nenádorové; geneticky modifikované pro povrchovou expresi IL2RA (CD25)
Aplikace
Screening protilátek; vývoj terapie zaměřené na IL2RA; výzkum biologie T-buněk; výzkum autoimunitních onemocnění; průtoková cytometrie

02Klasifikace

Organismus
čínský křeček
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Adhezivní a suspenzní
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This CHO cell line contains an IL2RA expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové buňky
Doba zdvojnásobení
cca 14–16 hodin

04Identifikátory

Citace
CHO-IL2RA (katalogové číslo Cytion 305980)
Daňové identifikační číslo NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W8

05Exprese a náchylnost

Povrchové antigeny
IL2RA (CD25)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium

Pro adherentní kultury: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)

Pro suspenzní kultury: Růstové médium CHO A (od společnosti InSCREENeX; katalogové číslo společnosti InSCREENeX INS-ME-1039)

Doplňky stravy
Pro adherentní kultury: Doplňte médium o 5% FBS. Přidejte geneticin (G418-Sulfat), abyste dosáhli konečné koncentrace 0,5 mg/ml.
Disociační činidlo
Pro adherentní kultury: Trypsin-EDTA
Subkultivace
Pro běžné kultivace adherentních buněk: Z adherentních buněk odsaďte staré kultivační médium a promyjte je PBS, abyste odstranili veškeré zbývající médium. Po odsátí PBS přidejte příslušný objem roztoku Trypsin/EDTA podle velikosti kultivační nádoby (např. 1 ml pro baňku T25, 3 ml pro baňku T75) a inkubujte při pokojové teplotě nebo 37 °C po dobu 5 až 10 minut nebo dokud se buňky neoddělí. Oddělování sledujte pod mikroskopem a v případě potřeby jemně poklepejte na nádobu, aby se buňky uvolnily. Po oddělení přidejte kompletní médium k inaktivaci trypsinu/EDTA, jemně resuspendujte buňky a alikvotní část buněčné suspenze přeneste do nové kultivační nádoby obsahující čerstvé médium. Umístěte nádobu do inkubátoru nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a každé 2 až 3 dny vyměňte médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
2 až 5 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení

Po rozmrazení rozdělte buňky v poměru 1:2 až 1:3 do baněk T25 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazování a adherovat (v případě adherujících kultur).

Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Dospělí