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CHO-IL2RA
Gewebe
Eierstock
Krankheit
Ovarialzellen des chinesischen Hamsters, nicht-neoplastisch; gentechnisch verändert zur Expression von IL2RA (CD25) auf der Zelloberfläche

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CHO-IL2RA

Cell line · Artikelnummer 305980

Haftungsausschluss: Die für Zelllinien angegebenen Preise gelten ausschließlich für Kunden aus dem akademischen Bereich bzw. gemeinnützige Einrichtungen. Für gewerbliche Unternehmen gelten die Preise...

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Auftragsfertigung
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Haftungsausschluss: Die für Zelllinien angegebenen Preise gelten ausschließlich für akademische/gemeinnützige Kunden. Für kommerzielle Einrichtungen beträgt der Preis ca. 6.250 €.
Wenn Sie eine kommerzielle Einrichtung vertreten oder sich nicht sicher sind, welche Kategorie auf Sie zutrifft, kontaktieren Sie uns bitte.


CHO-IL2RA-Zellen sind rekombinante Chinese-Hamster-Ovarialzellen (CHO-Zellen), die so verändert wurden, dass sie stabil den humanen Interleukin-2-Rezeptor-alpha (IL-2Rα; CD25/IL2RA) exprimieren, eine hochaffine Zytokinrezeptor-Untereinheit, die an der Regulation der T-Zell-Aktivierung und der Immunhomöostase beteiligt ist. CD25 bildet zusammen mit IL-2Rβ (CD122) und der gemeinsamen Gamma-Kette (CD132) einen Teil des heterotrimeren IL-2-Rezeptorkomplexes und ermöglicht so die hochaffine Bindung von Interleukin-2 sowie die Aktivierung nachgeschalteter JAK/STAT-Signalwege. Physiologisch wird CD25 in hohem Maße auf aktivierten T-Lymphozyten und regulatorischen T-Zellen (Tregs) exprimiert, und eine abnorme Expression wurde auch bei verschiedenen hämatologischen Malignomen und entzündlichen Erkrankungen beschrieben.

CHO-IL2RA-Zellen finden breite Anwendung in der Immunologie und in der therapeutischen Entwicklung zur Charakterisierung von monoklonalen Anti-CD25-Antikörpern, zytokinbasierten Therapeutika, bispezifischen Antikörpern und Strategien zur gezielten Beeinflussung von Immunzellen. Das stabile rekombinante Expressionssystem ermöglicht die quantitative Bewertung der Ligandenbindung, der Rezeptorbelegung, der Antikörperaffinität und der Rezeptorinternalisierung. Diese Zellen sind zudem wertvoll für die Entwicklung von Durchflusszytometrie-Assays, Wirksamkeitstests, zellbasierten Bindungsassays und Hochdurchsatz-Screening-Anwendungen, die die Modulation des IL-2-Signalwegs betreffen. Darüber hinaus können CHO-IL2RA-Modelle Studien unterstützen, die das selektive Targeting aktivierter T-Zellen oder Mechanismen im Zusammenhang mit regulatorischen T-Zellen bei Autoimmunerkrankungen, Transplantationen und Krebsimmuntherapien untersuchen.

Gewebe
Eierstock
Krankheit
Ovarialzellen des chinesischen Hamsters, nicht-neoplastisch; gentechnisch verändert zur Expression von IL2RA (CD25) auf der Zelloberfläche
Anwendungen
Antikörper-Screening; Entwicklung einer auf IL2RA ausgerichteten Therapie; Forschung zur T-Zell-Biologie; Forschung zu Autoimmunerkrankungen; Durchflusszytometrie

02Klassifizierung

Organismus
Chinesischer Hamster
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Adhärente und Suspension
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This CHO cell line contains an IL2RA expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzellen
Verdopplungszeit
ca. 14–16 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
CHO-IL2RA (Cytion-Katalognummer 305980)
NCBI-Steuer-ID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W8

05Expression und Anfälligkeit

Oberflächenantigene
IL2RA (CD25)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium

Für adhärente Kulturen: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)

Für Suspensionskulturen: CHO-Wachstumsmedium A (von InSCREENeX; InSCREENeX-Katalognummer INS-ME-1039)

Nahrungsergänzungsmittel
Für adhärente Kulturen: Ergänzen Sie das Medium mit 5% FBS. Geneticin (G418-Sulfat) hinzufügen, um eine Endkonzentration von 0,5 mg/ml zu erreichen.
Dissoziationsreagenz
Für adhärente Kulturen: Trypsin-EDTA
Subkultivierung
Für die routinemäßige adhärente Zellkultur: Saugen Sie das alte Kulturmedium von den adhärenten Zellen ab und waschen Sie sie mit PBS, um das restliche Medium zu entfernen. Nach dem Absaugen des PBS die entsprechende Menge Trypsin/EDTA-Lösung je nach Größe des Kulturgefäßes zugeben (z. B. 1 ml für einen T25-Kolben, 3 ml für einen T75-Kolben) und bei Raumtemperatur oder 37 °C 5-10 Minuten lang inkubieren, oder bis sich die Zellen ablösen. Überwachen Sie die Ablösung unter dem Mikroskop und klopfen Sie bei Bedarf vorsichtig auf das Gefäß, um die Zellen freizusetzen. Sobald sich die Zellen abgelöst haben, fügen Sie vollständiges Medium hinzu, um das Trypsin/EDTA zu inaktivieren, resuspendieren Sie die Zellen vorsichtig und transferieren Sie einen aliquoten Teil der Zellsuspension in ein neues Kulturgefäß mit frischem Medium. Stellen Sie das Gefäß in einen Inkubator, der auf 37°C mit 5%CO2 eingestellt ist, und wechseln Sie das Medium alle 2-3 Tage.
Split-Verhältnis
1 bis 5
Aussaatdichte
2 bis 5 x 104 Zellen/cm2
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen

Nach dem Auftauen die Zellen im Verhältnis 1:2 bis 1:3 in T25-Kolben aufteilen und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen (bei adhärenten Kulturen).

Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Erwachsener