Przejdź do treści
Komórki LXF-289
Chusteczka
Płuco
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
LxF289, LxF 289, LxF 289L

Dokumenty

Komórki LXF-289

Cell line · Numer produktu 300269

Linia komórkowa LxF-289 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka płuca, wyizolowana od 63-letniego pacjenta płci męskiej. Czas podwojenia tej linii komórkowej wynosi około...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa LxF-289 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka płuc uzyskana od 63-letniego mężczyzny. Ta linia komórkowa ma czas podwojenia wynoszący około 50 godzin, dzięki czemu nadaje się do badań wymagających stałej proliferacji komórek. LxF-289 jest szczególnie cenny w badaniach nad rakiem płuc, zwłaszcza niedrobnokomórkowym rakiem płuc (NSCLC), ponieważ zapewnia solidny model in vitro do badania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw progresji raka, oporności na leczenie i skutków interwencji terapeutycznych.

Badania nad LxF-289 wykazały, że ta linia komórkowa wykazuje cechy, które sprawiają, że reaguje na określone manipulacje genetyczne i terapeutyczne. Na przykład, badania wykazały, że LxF-289, wraz z innymi liniami komórkowymi raka płuc, może ulec znacznej śmierci komórkowej pod wpływem adenowirusa wyrażającego antysensowne białko szoku cieplnego 70 (Hsp70). Ta śmierć komórkowa jest niezależna od p53 i nie wymaga rozszczepienia DNA, co sugeruje, że Hsp70 odgrywa kluczową rolę w przetrwaniu komórek raka płuc. Warto zauważyć, że odpowiedź ta jest selektywna w stosunku do komórek nowotworowych, ponieważ normalne fibroblasty płuc i komórki nabłonka oskrzeli nie wykazują podobnego poziomu cytotoksyczności, gdy Hsp70 jest regulowany w dół, co podkreśla potencjał celowania w Hsp70 w terapii raka płuc.

Co więcej, LxF-289 został wykorzystany do badania wpływu napromieniowania na białka związane z opornością na leki. Linia komórkowa wykazywała nadekspresję S-transferazy glutationowej (GSTπ) zarówno na poziomie mRNA, jak i białka po napromieniowaniu. Ta nadekspresja jest związana z rozwojem oporności wielolekowej, co stanowi poważne wyzwanie w leczeniu klinicznym raka płuc. Odkrycia te podkreślają użyteczność LxF-289 w badaniu mechanizmów oporności i testowaniu nowych strategii jej przezwyciężania.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
  • LxF289
  • LxF 289
  • LxF 289L

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
LxF-289 (numer katalogowy Cytion 300269)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1394

05Ekspresja i podatność

Transkryptaza odwrotna
Negatywny

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/ml
Odnawianie płynów
Co 3 do 5 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
24 do 48 godzin
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
62 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski