Přejít na obsah
Buňky LXF-289
Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
LxF289, LxF 289, LxF 289L

Dokumenty

Buňky LXF-289

Cell line · Číslo výrobku 300269

Buněčná linie LxF-289 je buněčná linie lidského adenokarcinomu plic izolovaná od 63letého pacienta mužského pohlaví. Tato buněčná linie má dobu zdvojnásobení přibližně...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie LxF-289 je buněčná linie lidského adenokarcinomu plic, která byla vytvořena na základě 63letého pacienta. Tato buněčná linie má dobu zdvojení přibližně 50 hodin, takže je vhodná pro studie, které vyžadují konzistentní buněčnou proliferaci. LxF-289 je zvláště cenná ve výzkumu zaměřeném na rakovinu plic, zejména nemalobuněčný karcinom plic (NSCLC), protože poskytuje robustní in vitro model pro studium molekulárních mechanismů, které jsou základem progrese rakoviny, rezistence na léčbu a účinků terapeutických zásahů.

Studie na LxF-289 prokázaly, že tato buněčná linie vykazuje vlastnosti, díky nimž reaguje na specifické genetické a terapeutické manipulace. Výzkum například ukázal, že LxF-289 spolu s dalšími buněčnými liniemi rakoviny plic může při ošetření adenovirem exprimujícím antisense protein tepelného šoku 70 (Hsp70) prodělat významnou buněčnou smrt. Tato buněčná smrt je nezávislá na p53 a nevyžaduje štěpení DNA, což naznačuje, že Hsp70 hraje klíčovou roli v přežívání buněk rakoviny plic. Pozoruhodné je, že tato reakce je selektivní pro nádorové buňky, protože normální plicní fibroblasty a bronchiální epiteliální buňky nevykazují podobnou úroveň cytotoxicity, když je Hsp70 downregulován, což zdůrazňuje potenciál cílení na Hsp70 v terapii rakoviny plic.

Kromě toho byl LxF-289 použit ke studiu účinků ozáření na proteiny související s rezistencí k lékům. Tato buněčná linie vykazovala po ozáření nadměrnou expresi glutathion S-transferázy (GSTπ) na úrovni mRNA i proteinu. Tato nadměrná exprese je spojena s rozvojem mnohočetné lékové rezistence, která představuje významný problém v klinické léčbě karcinomu plic. Tato zjištění podtrhují užitečnost LxF-289 při zkoumání mechanismů rezistence a testování nových strategií k jejímu překonání.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • LxF289
  • LxF 289
  • LxF 289L

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší

04Identifikátory

Citace
LxF-289 (katalogové číslo Cytion 300269)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1394

05Exprese a náchylnost

Reverzní transkriptáza
Negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/ml
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Zotavení po rozmrazení
24 až 48 hodin
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
62 let
Etnická příslušnost
Kavkazský