Mine otse sisu juurde
LXF-289 rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
LxF289, LxF 289, LxF 289L

Dokumendid

LXF-289 rakud

Cell line · Toote number 300269

LxF-289 rakuliin on inimese kopsu adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud 63-aastaselt meespatsiendilt. Selle rakuliini kahekordistumisaeg on ligikaudu...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LxF-289 rakuliin on inimese kopsu adenokartsinoomi rakuliin, mis on loodud 63-aastasest meessoost patsiendist. Selle rakuliini kahekordistumisaeg on ligikaudu 50 tundi, mistõttu see sobib uuringuteks, mis nõuavad rakkude pidevat proliferatsiooni. LxF-289 on eriti väärtuslik kopsuvähi, eriti mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) uurimisel, kuna see on usaldusväärne in vitro mudel vähi progresseerumise, raviresistentsuse ja terapeutiliste sekkumiste mõju molekulaarmehhanismide uurimiseks.

Uuringud LxF-289-ga on näidanud, et sellel rakuliinil on omadused, mis muudavad selle tundlikuks konkreetsetele geneetilistele ja terapeutilistele manipulatsioonidele. Näiteks on uuringud näidanud, et LxF-289 ja teised kopsuvähi rakuliinid võivad läbida märkimisväärse rakusurma, kui neid töödeldakse antiseesivat kuumarabandusvalku 70 (Hsp70) ekspresseeriva adenoviirusega. See rakusurm ei sõltu p53-st ega nõua DNA lõhustamist, mis viitab sellele, et Hsp70 mängib olulist rolli kopsuvähirakkude ellujäämisel. Eelkõige on see vastus vähirakkude suhtes selektiivne, kuna normaalsed kopsu fibroblastid ja bronhide epiteelirakud ei näita sarnast tsütotoksilisuse taset, kui Hsp70 on alla reguleeritud, mis rõhutab Hsp70 sihtmärgi potentsiaali kopsuvähi ravis.

Lisaks on LxF-289-i kasutatud kiirituse mõju uurimiseks ravimresistentsusega seotud valkudele. Rakuliinil esines pärast kiiritamist glutatioon-S-transferaasi (GSTπ) üleekspressiooni nii mRNA kui ka valgu tasandil. See üleekspressioon on seotud multiresistentsuse kujunemisega, mis on oluline probleem kopsuvähi kliinilises ravis. Need leiud rõhutavad LxF-289 kasulikkust resistentsuse mehhanismide uurimisel ja selle ületamise uudsete strateegiate katsetamisel.

Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • LxF289
  • LxF 289
  • LxF 289L

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
LxF-289 (Cytioni katalooginumber 300269)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1394

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/ml
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
24 kuni 48 tundi
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
62 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia