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Cellule LXF-289
Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
LxF289, LxF 289, LxF 289L

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Cellule LXF-289

Cell line · Codice prodotto 300269

La linea cellulare LxF-289 è una linea cellulare di adenocarcinoma polmonare umano ottenuta da un paziente di sesso maschile di 63 anni. Questa linea cellulare ha un tempo di raddoppio di circa...

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Disponibile
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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare LxF-289 è una linea cellulare di adenocarcinoma polmonare umano ottenuta da un paziente maschio di 63 anni. Questa linea cellulare ha un tempo di raddoppiamento di circa 50 ore, che la rende adatta a studi che richiedono una proliferazione cellulare costante. La linea LxF-289 è particolarmente preziosa per la ricerca sul cancro del polmone, in particolare sul cancro del polmone non a piccole cellule (NSCLC), in quanto fornisce un solido modello in vitro per lo studio dei meccanismi molecolari alla base della progressione del cancro, della resistenza ai trattamenti e degli effetti degli interventi terapeutici.

Gli studi su LxF-289 hanno dimostrato che questa linea cellulare presenta caratteristiche che la rendono reattiva a specifiche manipolazioni genetiche e terapeutiche. Per esempio, la ricerca ha dimostrato che LxF-289, insieme ad altre linee cellulari di cancro del polmone, può subire una significativa morte cellulare quando viene trattata con un adenovirus che esprime la proteina 70 dello shock termico antisenso (Hsp70). Questa morte cellulare è indipendente da p53 e non richiede la scissione del DNA, suggerendo che Hsp70 svolge un ruolo cruciale nella sopravvivenza delle cellule di cancro al polmone. In particolare, questa risposta è selettiva per le cellule tumorali, poiché i fibroblasti polmonari normali e le cellule epiteliali bronchiali non mostrano livelli simili di citotossicità quando Hsp70 è downregolato, evidenziando il potenziale del bersaglio Hsp70 nella terapia del cancro del polmone.

Inoltre, la linea LxF-289 è stata utilizzata per studiare gli effetti dell'irradiazione sulle proteine legate alla resistenza ai farmaci. La linea cellulare ha mostrato una sovraespressione della glutatione S-transferasi (GSTπ) sia a livello di mRNA che di proteine in seguito all'irradiazione. Questa sovraespressione è associata allo sviluppo di resistenza multifarmaco, che rappresenta una sfida significativa nella gestione clinica del cancro al polmone. Questi risultati sottolineano l'utilità di LxF-289 per esplorare i meccanismi di resistenza e testare nuove strategie per superarla.

Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • LxF289
  • LxF 289
  • LxF 289L

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
LxF-289 (numero di catalogo Cytion 300269)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1394

05Espressione e suscettibilità

Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3-5 giorni
Recupero post-scongelamento
da 24 a 48 ore
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
62 anni
Etnia
Caucasico