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Células LXF-289
Tecido
Pulmão
Doença
Adenocarcinoma
Sinónimos
LxF289, LxF 289, LxF 289L

Documentos

Células LXF-289

Cell line · Número do produto 300269

A linha celular LxF-289 é uma linha celular de adenocarcinoma pulmonar humano obtida a partir de um doente do sexo masculino com 63 anos. Esta linha celular tem um tempo de duplicação de aproximadamente...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular LxF-289 é uma linha celular de adenocarcinoma do pulmão humano estabelecida a partir de um doente do sexo masculino com 63 anos de idade. Esta linha celular tem um tempo de duplicação de aproximadamente 50 horas, o que a torna adequada para estudos que requerem uma proliferação celular consistente. A LxF-289 é particularmente valiosa na investigação centrada no cancro do pulmão, especialmente no cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC), uma vez que proporciona um modelo in vitro robusto para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à progressão do cancro, a resistência ao tratamento e os efeitos das intervenções terapêuticas.

Os estudos sobre a LxF-289 demonstraram que esta linha celular apresenta caraterísticas que a tornam reactiva a manipulações genéticas e terapêuticas específicas. Por exemplo, a investigação demonstrou que a LxF-289, juntamente com outras linhas celulares de cancro do pulmão, pode sofrer uma morte celular significativa quando tratada com um adenovírus que exprime a proteína 70 de choque térmico antisense (Hsp70). Esta morte celular é independente da p53 e não requer a clivagem do ADN, sugerindo que a Hsp70 desempenha um papel crucial na sobrevivência das células cancerosas do pulmão. Esta resposta é selectiva para as células cancerígenas, uma vez que os fibroblastos pulmonares normais e as células epiteliais brônquicas não apresentam níveis semelhantes de citotoxicidade quando a Hsp70 é desregulada, o que realça o potencial de utilização da Hsp70 na terapia do cancro do pulmão.

Além disso, a LxF-289 foi utilizada para estudar os efeitos da irradiação nas proteínas relacionadas com a resistência aos medicamentos. A linha celular apresentou uma sobreexpressão da glutationa S-transferase (GSTπ), tanto a nível de ARNm como de proteínas, após a irradiação. Esta sobreexpressão está associada ao desenvolvimento de resistência a múltiplos fármacos, o que constitui um desafio significativo na gestão clínica do cancro do pulmão. Estas descobertas sublinham a utilidade do LxF-289 para explorar os mecanismos de resistência e testar novas estratégias para a ultrapassar.

Tecido
Pulmão
Doença
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • LxF289
  • LxF 289
  • LxF 289L

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus

04Identificadores

Referência
LxF-289 (número de catálogo Cytion 300269)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1394

05Expressão e suscetibilidade

Transcriptase reversa
Negativo

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/ml
Renovação de fluidos
A cada 3 a 5 dias
Recuperação após o descongelamento
24 a 48 horas
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
62 anos
Etnia
Caucasiano