Siirry sisältöön
LXF-289-solut
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
LxF289, LxF 289, LxF 289L

Asiakirjat

LXF-289-solut

Cell line · Tuotenumero 300269

LxF-289-solulinja on ihmisen keuhkojen adenokarsinoomasta peräisin oleva solulinja, joka on peräisin 63-vuotiaalta miespotilaalta. Tämän solulinjan kaksinkertaistumisaika on noin...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

LxF-289-solulinja on ihmisen keuhkojen adenokarsinooma-solulinja, joka on peräisin 63-vuotiaasta miespotilaasta. Tämän solulinjan kaksinkertaistumisaika on noin 50 tuntia, joten se soveltuu tutkimuksiin, jotka edellyttävät solujen tasaista lisääntymistä. LxF-289 on erityisen arvokas keuhkosyöpään, erityisesti ei-pienisoluiseen keuhkosyöpään (NSCLC), keskittyvässä tutkimuksessa, koska se tarjoaa vankan in vitro -mallin syövän etenemisen, hoitoresistenssin ja terapeuttisten toimenpiteiden vaikutusten taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen.

LxF-289:llä tehdyt tutkimukset ovat osoittaneet, että tällä solulinjalla on ominaisuuksia, joiden ansiosta se reagoi tiettyihin geneettisiin ja terapeuttisiin manipulaatioihin. Tutkimukset ovat esimerkiksi osoittaneet, että LxF-289 ja muut keuhkosyöpäsolulinjat voivat saada aikaan merkittävän solukuoleman, kun niitä hoidetaan antisense-lämpösokkiproteiini 70:tä (Hsp70) ilmentävällä adenoviruksella. Tämä solukuolema on p53:sta riippumaton eikä edellytä DNA:n pilkkoutumista, mikä viittaa siihen, että Hsp70:llä on ratkaiseva rooli keuhkosyöpäsolujen selviytymisessä. Erityisesti on huomattava, että tämä vaste on valikoiva syöpäsoluille, sillä normaalit keuhkojen fibroblastit ja keuhkoputkien epiteelisolut eivät osoita samanlaista sytotoksisuutta, kun Hsp70:tä vähennetään, mikä korostaa Hsp70:n kohdentamisen mahdollisuuksia keuhkosyövän hoidossa.

Lisäksi LxF-289:n avulla on tutkittu säteilytyksen vaikutuksia lääkeresistenssiin liittyviin proteiineihin. Solulinjassa esiintyi glutationi-S-transferaasin (GSTπ) yliekspressiota sekä mRNA- että proteiinitasolla säteilytyksen jälkeen. Tämä yliekspressio liittyy monilääkeresistenssin kehittymiseen, mikä on merkittävä haaste keuhkosyövän kliinisessä hoidossa. Nämä havainnot korostavat LxF-289:n hyödyllisyyttä resistenssimekanismien tutkimisessa ja uusien strategioiden testaamisessa resistenssin voittamiseksi.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • LxF289
  • LxF 289
  • LxF 289L

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
LxF-289 (Cytionin luettelonumero 300269)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1394

05Ilmentyminen ja alttius

Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/ml
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
24-48 tuntia
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
62 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen