U-CH1

Linia komórkowa U-CH1 jest pierwszym ustanowionym modelem komórek ludzkiego struniaka, pochodzącym z nawracającego struniaka krzyżowego. Struniaki są rzadkimi, wolno rosnącymi, miejscowo inwazyjnymi nowotworami, które powstają z pozostałości struny grzbietowej i występują głównie wzdłuż szkieletu osiowego. U-CH1 wykazuje cechy cytogenetyczne charakterystyczne dla struniaka, w tym klonalne aberracje chromosomowe, takie jak der(1)t(1;22), delecje na chromosomach 4, 5, 6, 9, 10 i 20 oraz pochodny chromosom 20 wynikający z t(10;20). Hybrydyzacja genomowa porównawcza ujawniła powtarzające się zmiany liczby kopii DNA w strunowcach, w szczególności utraty na 1p i 3p oraz zyski na 7q, 5q, 12q i 20. Profil cytogenetyczny U-CH1 ściśle odzwierciedla profil guza macierzystego, co potwierdza jego znaczenie biologiczne.

Pod względem funkcjonalnym i molekularnym U-CH1 i inne linie komórkowe struniaka wykazują charakterystyczne cechy struniaka, w tym ekspresję brachyury, czynnika transkrypcyjnego uważanego za kluczowy marker diagnostyczny. U-CH1 zawiera również delecje CDKN2A i nie wykazuje ekspresji białka p16, co jest powtarzającą się zmianą genetyczną w struniakach. Zmiana ta prowadzi do nadaktywności szlaku CDK4/6, co sprawia, że U-CH1 jest wrażliwy na inhibitory CDK4/6, takie jak palbocyklib. Leczenie palbocyklibem znacznie zmniejszyło poziom fosforylowanego Rb i zahamowało proliferację in vitro, co wskazuje, że U-CH1 może być cennym modelem przedklinicznym do oceny terapii ukierunkowanych na cykl komórkowy. Linia komórkowa została również zweryfikowana poprzez profilowanie mRNA i białek, potwierdzając jej reprezentatywność dla pierwotnych guzów strunowych pod względem ekspresji i wzorców genomowych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym