Mine otse sisu juurde
U-CH1
Kude
Luu, ristluu
Haigus
Sakraalne kordoom
Sünonüümid
UCH-1, UCH1

Dokumendid

U-CH1

Cell line · Toote number 305885

The U-CH1 cell line is the first established permanent human chordoma cell model, derived from a recurrent sacral chordoma. Chordomas are rare, slow-growi...

€500.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

U-CH1 rakuliin on esimene loodud püsiv inimese kordoomi rakumudel, mis on saadud korduvast sakraalsest kordoomist. Kordoomid on haruldased, aeglaselt kasvavad, lokaalselt invasiivsed kasvajad, mis pärinevad notokordi jääkidest ja esinevad peamiselt teljeluustikus. U-CH1-l on kordoomile iseloomulikud tsütogeneetilised omadused, sealhulgas kloonilised kromosoomaberratsioonid, nagu der(1)t(1;22), deleetsioonid kromosoomidel 4, 5, 6, 9, 10 ja 20 ning t(10;20) tulemusel tekkinud derivaatkromosoom 20. Võrdlev genoomhübridisatsioon näitas kordoma puhul korduvaid DNA koopiaarvu muutusi, eriti kadusid 1p ja 3p ning juurdekasvu 7q, 5q, 12q ja 20. U-CH1 tsütogeneetiline profiil peegeldab täpselt selle emakasvaja profiili, mis tugevdab selle bioloogilist olulisust.

Funktsionaalselt ja molekulaarselt näitavad U-CH1 ja teised kordoomirakkude liinid kordoomi iseloomulikke tunnuseid, sealhulgas brachyury ekspressiooni, mis on transkriptsioonifaktor, mida peetakse oluliseks diagnostiliseks markeriks. U-CH1-s esinevad ka CDKN2A deleetsioonid ja puudub p16 valgu ekspressioon, mis on kordoomides korduv geneetiline muutus. See muutus viib CDK4/6 signaalitee hüperaktiveerumiseni, muutes U-CH1 tundlikuks CDK4/6 inhibiitorite, nagu palbotsiklibi suhtes. Ravi palbotsiklibiga vähendas oluliselt fosforüülitud Rb taset ja pärssis proliferatsiooni in vitro, mis näitab, et U-CH1 võib olla väärtuslik prekliiniline mudel rakkude tsükli suunatud ravimeetodite hindamiseks. Rakuliini on valideeritud ka mRNA ja valgu profiili abil, mis kinnitab selle representatiivsust primaarse kordoomavähi ekspressiooni ja genoomimustrite osas.

Kude
Luu, ristluu
Haigus
Sakraalne kordoom
Sünonüümid
  • UCH-1
  • UCH1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Mesenküümne sarnane, muutuvate vakuoolidega
Rakutüüp
Kordoom
Kahekordistumisaeg
~1 nädal

04Tunnused

Viide
U-CH1 (Cytioni katalooginumber 305885)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_4988

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, lihtne, p.Pro72Arg (c.215C>G), täpsustamata

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
IMDM, w: 4,5 g/L glükoos, w: 4 mM L-glutamiin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820800a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
56 aastat
Etniline kuuluvus
Valge