U-CH1

U-CH1-cellelinjen er den første etablerte permanente humane kordomcellmodellen, avledet fra et tilbakevendende sakralt kordom. Kordomer er sjeldne, langsomt voksende, lokalt invasive svulster som oppstår fra notokordale rester og primært forekommer langs det aksiale skjelettet. U-CH1 viser cytogenetiske trekk som er karakteristiske for kordom, inkludert klonale kromosomavvik som der(1)t(1;22), deleksjoner på kromosomene 4, 5, 6, 9, 10 og 20, og et derivat av kromosom 20 som følge av t(10;20). Komparativ genomisk hybridisering avdekket gjentatte endringer i DNA-kopiantall i kordomer, særlig tap på 1p og 3p og gevinster på 7q, 5q, 12q og 20. Det cytogenetiske profilet til U-CH1 speiler nøye det til dets foreldretumor, noe som forsterker dets biologiske relevans.

Funksjonelt og molekylært viser U-CH1 og andre kordomcellelinjer kjennetegn på kordom, inkludert uttrykk for brachyury, en transkripsjonsfaktor som anses som en viktig diagnostisk markør. U-CH1 har også deleksjoner av CDKN2A og mangler p16-proteinekspresjon, en tilbakevendende genetisk endring i kordomer. Denne endringen fører til hyperaktivering av CDK4/6-veien, noe som gjør U-CH1 følsom for CDK4/6-hemmere som palbociclib. Behandling med palbociclib reduserte fosforylerte Rb-nivåer betydelig og hemmet proliferasjon in vitro, noe som indikerer at U-CH1 kan være en verdifull preklinisk modell for evaluering av cellecyklus-målrettede terapier. Cellelinjen er også validert gjennom mRNA- og proteinprofilering, noe som bekrefter at den er representativ for primære kordomtumorer når det gjelder uttrykk og genomiske mønstre.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring